【Live Demo】Unagi 和 Big Tuna 换液全过程
关于本次 Live Demo
单抗筛选要一次给很多样品换液,AAV 要浓缩到精确的目标值,LNP 则要尽快除去 ethanol,免得粒径变化。这些场景都要求换液快、少占人手,而其他换液和浓缩方法常见的问题是膜表面积聚、堵塞。
Unchained Labs 的 Unagi 和 Big Tuna 用同一套专有技术:正压驱动超滤/透析过滤(positive pressure-based UF/DF)。换液腔里所有样品同时受到 15/30/60 psi 均匀正压,轨道混匀则让目标分子留在溶液里、不贴膜,换液和回收都因此受益。两台机器差别主要在通量。Unagi 是台式 1–8 根 Una,适合在台面上处理少量样品;Big Tuna 是 24/96 孔板高通量液体工作站,用于批量筛选。
在 29 分钟的完整 live demo 里,Del Ray Jackson 依次演示了耗材、硬件、软件和实机操作。后半段 Q&A 由 Ross Walton 主持、Del Ray 逐一回答,问题偏实操,包括气源要求、tip 用完怎么办、冷房能不能用、IgG 回收率、MWCO 选择和目标浓度怎么设。
回收率这一问答得最具体。规格按标准 IgG 给出的回收率是 96%;客户在 0.5-1.5 mg/mL 的单抗上实测在 80% 后段到 90% 出头,仍高于他们用离心柱的结果。
### 你将了解到
- 00:00:00 · 00:01:00 · 开场与主持介绍 · Ross Walton(主持)介绍 Del Ray Jackson(Marketing Manager, Buffer Exchange)。Zoom Q&A 说明。
- 00:01:00 · 00:03:31 · 为什么需要换液 + 共同核心技术 · 生物制剂 / 基因治疗的换液痛点:单抗高通量筛选、AAV 需浓到目标值、LNP 快速去 ethanol 防粒径变化。Unagi 和 Big Tuna 共用专有技术:正压驱动超滤/透析过滤(UF/DF),15 / 30 / 60 psi 均匀正压配合同步轨道混匀,因此不堵膜、样品回收率高。
- 00:03:31 · 00:07:00 · 耗材对比:Unfilter 96 / 24 vs Una · Big Tuna 用 Unfilter 滤板(再生纤维素膜,MWCO 3/10/30/100 kDa,96 孔 100-450 µL 或 24 孔 450 µL-8 mL)。Unagi 用单根 Una(1-8 根样品架,每根 0.5-8 mL)。目前两者用的膜相同,差异主要在通量。
- 00:07:00 · 00:10:40 · 硬件对比 · 两台都有换液腔 + 超声体积传感器(每样品 ±10% 精度)+ 轨道混匀。Big Tuna 是 6 通道液体工作站,有 8 个储液槽 + tip rack hotel + 抓手机械臂。Unagi 是台式一体机,用 50 mL 锥形管(如 Falcon 管,尺寸匹配即可)作 buffer 储液、单通道 1 mL 气体位移移液。
- 00:10:40 · 00:14:30 · Big Tuna 软件演示 · 依次填实验名、选 buffer exchange ± concentrate、Excel 导入 sample/buffer 列表、拖拽分配孔位。再选预设生物分子模板(压力档位、混匀速度、每循环去除量可调),最后生成购物清单和俯视图摆放向导。
- 00:14:30 · 00:16:25 · Unagi 软件演示 · 先选样品数量(1-8)和 MWCO(10/30/100 kDa);sample/buffer 名可改,相同 buffer 名表示同源。起始体积要求统一,因为正压对所有样品平等作用。之后设目标换液倍数,按图形化摆放向导放样。
- 00:16:25 · 00:19:02 · 实机运行 · Big Tuna 先测四角校准板位,再用超声逐孔测体积,然后换液腔关门加压。Unagi 先启动轨道混匀,再用单个 1 mL tip 以气体位移移液加 buffer。自适应正压时间确保流得最快的样品也不会抽干。
- 00:19:02 · 00:25:59 · Q&A 上半场 · 气源需求是 CDA 洁净干燥空气,house air 或小压缩机都行,但 Unagi 不支持冷房(电子元件会凝露)。tip 用完时仪器暂停并发通知(Unagi 可推手机)。样品浓度差异应在同量级,预设模板按浓度分档,最低一档是 <0.5 mg/mL。输错体积时按超声实测相对规范,不会干死样品。两台都用 air-displaced 气体位移移液;dilute and filter 功能用于高浓度蛋白预稀释。
- 00:25:59 · 00:29:22 · Q&A 下半场 + 结束 · 回收率:规格按标准 IgG 为 96%;客户在 0.5-1.5 mg/mL 的单抗上实测在 80% 后段到 90% 出头,仍优于离心柱。Unagi 的 Una 支持 10/30/100 kDa MWCO,3 kDa 只有 Unfilter 96。目标浓度通过「起始浓度 + 目标体积」反推,用 Stunner / Lunatic 辅助定浓度。Big Tuna 任意孔组合都能用。联系方式 support@unchainedlabs.com。
- 看懂 Unagi 和 Big Tuna 的通量差异:1-8 根台式 vs 24/96 孔板高通量
- 理解正压 UF/DF 怎么做到不堵膜、高回收:均匀正压 + 同步轨道混匀的配合
- 掌握软件设置差别:Big Tuna 支持 Excel 列表导入、Unagi 预生成默认名手工改
- 清楚通用边界条件:气源 CDA、样品浓度同量级、冷房不支持,以及低浓度 IgG 的实测回收率