Unagi 装机和第一次开机前要知道的事

Unagi 装机和第一次开机前要知道的事

Unagi 装机前要备好两样:0.55–0.69 MPa 的洁净干燥空气或氮气,以及四周留足间距、放得下 65 kg 仪器的台面。装好后,它用压力驱动的超滤/透析过滤(UF/DF)方法,同时处理 1–8 个样品,回收率 ≥96%(取决于样品和制剂)。开机后先按实验目的选定实验类型,后面的设置都由这一步决定。

Una 放进腔体以后,仪器自动做什么

样品装在名为 Una 的一次性超滤杯里,放入仪器的加压腔体。仪器自动加压过滤、测量剩余体积、补加新缓冲液,如此循环直到达到目标交换率。软件实时追踪每个样品的状态;错误恢复设为自动时,整个过程可以无人值守。

Unagi 仪器正面。黑色外壳,前面板的开门按钮在通电后亮蓝色灯。

这套流程适用于蛋白、核酸、AAV 和 LNP 等样品,浓度最高可达 200 mg/mL(取决于样品和制剂)。8 个 Una 各自独立,所以单次实验可以同时跑 8 个不同的样品-缓冲液组合,每个样品的工作体积在 0.5–8 mL 之间。

先选实验类型:四种类型各做什么

打开 Unagi 软件,主界面左侧列出四个实验类型。区别在于是否换缓冲液、是否浓缩,以及样品体积是否超出 Una 的容量:

### 缓冲液交换(Buffer Exchange)

只换缓冲液。旧缓冲液被过滤掉,自动补加新缓冲液,反复循环直到达到目标交换百分比(50%–99.99%)。交换完成后样品体积恢复到初始值,浓度不变。

### 缓冲液交换 + 浓缩(Buffer Exchange + Concentrate)

先做缓冲液交换,再做浓缩。比如 8 mL 样品先换液到 96% 交换率,再浓缩到 4 mL(2 倍浓缩)。适合需要同时换液和提浓的制剂筛选流程。

### 仅浓缩(Concentrate Only)

不换缓冲液,只做浓缩。样品被过滤减体积到目标值。缓冲液管里放的是原始缓冲液,用来在样品浓缩过快时补回。

### 大体积样品浓缩(Reduce Sample Volume)

处理大体积稀释样品。最多可处理 48 mL 稀释样品:8 mL 装在 Una 里,40 mL 装在锥形管里。样品分多轮过滤和回填,最终浓缩到 Una 内的目标体积。适合收获液浓缩等需要处理大体积的场景。

操作台(Deck)的 6 个功能区

打开 Unagi 前门,里面是黑色的操作台(deck),分成 6 个功能区。软件的装载确认页会高亮这些区域,提示耗材该放在哪里,所以先记住它们的名称和作用。

Unagi 操作台组件标注:①缓冲液管架 ②加压交换腔体 ③样品架 ④移液通道 ⑤超声波体积传感器 ⑥吸头架

编号 / 名称 / 作用

①:名称 缓冲液管架(Buffer rack);作用 放置 1–16 根 50 mL 锥形管,装目标缓冲液

②:名称 加压交换腔体(Buffer exchange chamber);作用 实验时 Una 放在这里,门关闭后加压驱动过滤

③:名称 样品架(Una sample rack);作用 放置 1–8 个 Una

④:名称 移液通道(1 mL pipette channel);作用 自动移液通道,负责从锥形管吸取缓冲液补加到 Una 中

⑤:名称 超声波体积传感器(Ultrasonic volume sensor);作用 非接触式传感器,每次加压后测量 Una 内剩余液面高度,换算成体积

⑥:名称 吸头架(Tip racks);作用 放置一次性吸头,最多 5 个架(每架 96 个吸头)。可在软件中开启吸头复用(Reuse Tips)节省用量

操作台最右侧还有一排盖帽(Caps)槽位。暂停实验并取出某个 Una 后,需要用盖帽封住空出的腔体位置,再继续运行。

开机和关机顺序

Unagi 的主电源按钮在仪器左侧偏后方。通电后前面板按钮亮蓝色灯,表示仪器已连接并就绪。

### 开机步骤

- 按下仪器左侧主电源按钮,等待前面板按钮亮蓝灯

- 打开配套电脑

- 双击桌面 Unagi 图标启动软件

### 关机步骤

- 先关闭 Unagi 软件

- 关闭电脑

- 最后按下仪器侧面主电源按钮关机

注意:关机时必须先完全关闭软件,再关仪器。长时间不用或需要电源重启(power cycle)时,按上述顺序完全关机。平时电脑可以单独开关,不受仪器电源状态限制。

技术规格一览

参数:规格

同时处理样品数:1–8 个

工作体积:0.5–8 mL(Una)

最低进样体积:500 µL

样品浓度:最高 200 mg/mL(取决于样品和制剂)

缓冲液交换效率:50%–99.99%,或最多 10 个透析体积

样品回收率:≥96%(取决于样品和制剂)

轨道混合速度:0–1000 RPM,可调

Una 膜材料:再生纤维素(RC),截留分子量(MWCO)10、30、100 kDa 三种

仪器尺寸:63 × 57 × 66 cm(宽 × 深 × 高),65 kg

安装环境要求

Unagi 由 Unchained Labs 工程师安装,场地要按下表提前备好。这些条件在日常使用中也要一直保持。

条件:要求

温度:18–28 °C

湿度:0–70% RH,非冷凝

电源:100–260 V,50/60 Hz,标准插座(NEMA 5-15P)

气源:洁净干燥空气(CDA)或氮气,0.55–0.69 MPa(80–100 psi)

气源接口:1/4"(6.35 mm)SMC "One-Touch" 快接头

后方间距:距墙 ≥10 cm(通风散热)

左侧间距:≥15 cm(气源和线缆连接)

注意:Unagi 仅限室内使用。安装后如果移动了仪器位置,必须由 Unchained Labs 工程师重新校准(re-qualify)后才能使用。仪器重 65 kg,搬运需要至少两人配合。

### 下一步

→ UF/DF 原理与 Una 耗材

→ 从打开软件到开始运行