Sunshine 用户指南(3/7):四联注射泵与自动进样阀
一对注射器交替工作,出液不断流
四联注射泵专为微流控设计,每台控制两路独立液流。单通道流速 0.05–10 mL/min,压力最高 10 bar。每个通道都有在线压力传感器,压力数据由软件采集并记录。
每个通道用一对注射器循环工作:左侧 5 mL,右侧 2.5 mL,左侧容积是右侧的两倍。一个出液周期如下:
- 两支注射器先同时吸满液体。
- 右侧注射器向系统出液,直到排空。此时二通阀把左侧注射器隔开。
- 右侧排空后阀切换,左侧注射器立即同时向系统和右侧注射器出液。这样流速保持在目标值,右侧也同时被灌满。
- 左侧排空后阀再切换,右侧开始出液,左侧重新吸液,循环往复。
任何时刻都有一支注射器在向系统出液,所以流速稳定,脉动很小。
注射器交接:(a) 左侧吸液、右侧出液;(b) 左侧出液,同时把右侧灌满。
各通道的常规用途:
- 四联注射泵 1:通道 1A 通常走水相 / 缓冲液,通道 1B 通常走有机溶剂(如乙醇)。
- 四联注射泵 2(仅 Sunshine):通道 2A 通常走稀释液,通道 2B 供手动操作使用。
四联注射泵正面:顶部 LED 电源按钮;每个通道由阀(Valve Input / Valve Output)、压力传感器和注射器对组成,注射器底部用手拧螺丝固定。
供电与通信
四联注射泵只通过电脑上的软件控制,用白色 RS232 转 USB 线连接电脑:RS232 端接泵背面的 DB9 口,USB 端接电脑。
泵有两个电源开关:背面三芯电源插座旁的主电源开关,和正面的 LED 电源按钮。两个都打开,泵才通电。建议先把阀、压力传感器和注射器全部装好,再给泵通电并连接软件,这样软件能正确识别所有部件。
阀与压力传感器免工具拆装
液体经 PCTFE 二通阀进出注射器。PCTFE 耐化学腐蚀,系统因此能用多种液体。泵运行时阀自动切换,保证出液连续、扰动小。阀的出液口装有一个白色 FFKM 密封圈,它保证阀与压力传感器之间不漏液,必须装到位。
压力传感器读取阀与下游设备(Sunny、收集器等)之间的压力,也可以为实验设定压力上限,防止过压。传感器直接装在阀体上,拆装不需要工具。
左:阀体装压力传感器的一面,中间是来自储液瓶的进液口,下方金色触点与传感器相连。右:压力传感器,两颗手拧螺丝固定到阀上,Output 口是通往系统的 ¼"-28 出液口。
拆下阀与传感器
- 注射器已装或要装时,先拧下注射器的固定螺丝。
- 阀还插在泵体上时,一只手握住阀。
- 把阀用力拔离泵体,必要时轻轻上下撬动。
- 阀、压力传感器(以及已装的注射器)随之脱离泵体。
- 拧松压力传感器正面的两颗手拧螺丝,把传感器从阀块上取下。
装回压力传感器
- 对准压力传感器与阀体之间的金色通信触点。
- 把对角位置的两颗手拧螺丝拧进阀体。两颗交替拧,让传感器端面受压均匀。
- 手紧即可,不需要工具。
- 另一个通道照此组装,把两套阀–传感器组件放在一旁备用。
先把注射器装到阀上,再装进泵体
注射器要在阀离开泵体时装到阀上。这样有足够空间把注射器拧进阀口,也方便在接上驱动杆前调好活塞高度。注射器对标有 LEFT 和 RIGHT,对应阀上的左右两个口。
装注射器前先关掉泵的电源。泵运行时操作注射器有伤手的风险。
- 取出注射器。活塞和针筒出厂时分开包装。
- 拿起已装好压力传感器的阀,把 LEFT 针筒拧进阀底部左侧的口,手紧至牢固即可。
- 在浅盘或小瓶里倒入几毫升过滤后的 DI 水,深度要能没过 PTFE 活塞。活塞在水里润湿后更顺滑。
- 转动活塞,让底部手拧螺丝孔朝向泵的正面,把润湿的活塞插入针筒。
- RIGHT 注射器照此组装。
注射器拧进阀体时不要拧过头。注射器头部有一段伸出的 PTFE 垫圈,填在不锈钢螺纹和 PCTFE 阀体之间。拧得过紧会把这段 PTFE 压变形,缩短注射器寿命,压得严重时还会漏液。
注射器头部的 PTFE 垫圈:左边已被部分压扁,右边是新的。
注射器的日常冲洗、拆洗和漏液判断,另见Sunny Suite 注射器维护。
在初始化状态下把阀组件装回泵体
最好在泵处于初始化状态时装:两个注射器驱动杆都停在行程顶端。
- 先用手拧下泵驱动杆上的手拧螺丝,放在一旁。装好注射器后还要用它固定。
- 把阀组件用力插进泵体。面对泵时,压力传感器在右前方。
- 注意注射器活塞不要顶到驱动杆支架。必要时把活塞完全推进针筒,让它避开支架。
- 插入前,确认活塞底部的螺丝孔朝前。轻推或轻拉活塞对准孔位,别把注射器从阀上带松。必要时可以把活塞整根抽出,按正确方向重新插入。
- 听到「咔嗒」一声,说明阀已完全插到位。
- 把手拧螺丝穿过驱动杆支架,拧进活塞底部的孔。
- 另一个通道照此操作。
阀组件插回泵体:通道处于初始化状态,活塞完全推入针筒,螺丝孔已对准。
把手拧螺丝穿过驱动杆支架,固定注射器活塞。
泵的接管与接头
Sunshine 随机配一套定标管路包。接四联注射泵用到的管路如下(Lite 和 Single 的标签略有差别,以第 1 篇的流路图为准):
袋号 / 标签 / 数量
1:标签 1A、1B(Sunshine 另有 2A、2B),进液管;数量 4
3:标签 3,注射泵到进样阀;数量 2
4:标签 4D,稀释泵到 Sunny 入口(仅 Sunshine);数量 1
- 四联注射泵 1:两个通道各接一根 1 号进液管;出液口分别用 3 号管接进样阀 1 和进样阀 2。
- 四联注射泵 2(仅 Sunshine):通道 A 接进液管,用到稀释时出液口接 4D 到 Sunny;通道 B 只接进液管,没有标准出液管。
两种管径,各用对接头
管路都已做好接头,不需要自己制作。了解接头结构,换管时更有把握。阀和压力传感器上的接口都是 ¼"-28 螺纹(进样阀除外)。一套接头包括黄色 ETFE 密封圈、316 不锈钢卡套和白色半透明 ¼"-28 螺母。
- 1/8" OD × 1.5 mm ID 管:用于泵的进液端,配大孔螺母。泵吸液时管内呈负压,管径大可以减少空化,避免气体从溶液中析出。
- 1/16" OD × 0.8 mm ID 管:用于泵的出液端,配小孔螺母。管阻更大,出液更平稳。部分应用也可以换成 1.00 mm ID 的管。
1/16" 管的接头部件:螺母、不锈钢卡套和黄色密封圈。
两种管径的接头装法相同:
- 把螺母套到管上,螺纹端朝管口。管口要切平,没有碎屑。
- 套上不锈钢卡套,小凸缘朝管口。卡套要部分滑进螺母,卡套外留约 0.5 cm 管。
- 套上密封圈,平的一端朝管口,密封圈外留约 0.5 cm 管。
- 把螺母拧进 ¼"-28 接口。卡套和密封圈被推到管端,卡套压紧固定。
- 拧下螺母,确认卡套已压紧。管头多出的部分用锋利刀片切掉,别伤到卡套。
压力到 10 bar 时泵报过压
随泵提供的注射器最高耐压 10 bar。运行时设定目标流速,泵驱动电机达到这个流速。流速越高,系统压力越高,具体还取决于所用液体、Sunny 和流速设定。
设定流速相对实验配置过高,或流路里有碎屑造成阻塞,压力都会升高。压力到 10 bar 上限时,泵报过压错误(overpressure error)。
- 先清除报警,再试运行一次。
- 反复报警时,调整实验参数,或沿流路逐段查找压力升高的来源。
- 泵启停后,压力会有一小段时间的升降滞后(hysteresis),一般不到 10 秒。命令泵启停后要接管或拆管,先等这段时间过去。
过压的系统排查和 Sunny 反冲,见第 7 篇。
每次实验后冲洗泵和注射器
阀、注射器和压力传感器里的残液,要在实验完成后清掉,系统闲置前更要清干净。注射器保养不到位会加快磨损,还可能把碎屑带进流路。碎屑多了,系统压力升高,甚至报过压。这几个部件串联在一条流路上,可以一起冲洗。
- 把实验用液从泵入口断开:可以把进液管从储液瓶换到另一个瓶,也可以从阀上拔下进液管,改接清洗瓶。
- 换成合适的溶剂(IPA、乙醇或相应缓冲液),在 Sunny Suite 中运行 Sunshine Prime 方案。出液流速按所接的 Sunny 设定。也可以在 Devices 窗口手动操作:让各通道吸液、排液 2–3 次,或设为连续出液,跑完 2–3 个泵周期。
- 溶剂冲完后,把进液管从溶剂瓶中取出,重复第 2 步,把溶剂排出系统。
- 下次实验前,往储液瓶加入所需溶剂和缓冲液,确认进液管插在液面以下,再重复第 2 步,用工作液替换系统里的空气。
拆下或更换注射器
注射器损坏或堵塞时,需要拆下清洗或换新:
- 按上面的方法排空泵内液体。
- 初始化四联注射泵的每个通道,让注射器停在固定的拆装位置。可以运行 Sunshine Initialize 方案,也可以在软件的 Devices 页手动初始化。
- 拧下固定注射器的手拧螺丝。
- 把阀、压力传感器和注射器整套组件从泵上拔出。
- 抽出活塞,用干净的过滤溶剂清洗活塞密封面和针筒。用压缩空气吹干,或自然晾干。
- 重新组装。装回前确认活塞端面和 PTFE 垫圈上没有灰尘、颗粒或纤维。活塞插回针筒前,建议先用去离子水润湿。
在 Devices 页手动控制泵
以下操作适用于 Sunshine 和 Sunshine Lite。Sunshine Single 的泵只能通过方案运行,见第 6 篇。系统电脑出厂预装最新版 Sunny Suite 软件,也可以向技术支持索取安装文件。
- 给四联注射泵装好阀、压力传感器、注射器和管路。
- 接上 USB–RS232 通信线和电源线。
- 打开泵的电源。
- 打开 Sunny Suite 软件。
- 点左下角的 Devices 标签,窗口会列出所有已识别的硬件。每个泵通道单独显示为一个面板,默认名为 Quad Pump 1/2/3/4。
- 泵状态显示 Not Initialized。在 Devices 页点 Initialize 只初始化该通道;在 Protocols 窗口运行 Initialize 方案,所有 Sunshine 硬件同时初始化。泵断电重启后,各通道要重新初始化。
- 初始化完成后状态变为 Idle,通道即可使用。
泵通道控制面板:左侧可改通道名、注射器类型和压力上限;右侧依次是初始化、吸液、排液、定量排液、连续出液和定时出液。
面板上各功能的作用:
功能:作用
Tare Pressure Sensors:把压力传感器归零。归零时先拆下或拧松接头,免得残余压力影响归零。
Set Pump Name:给该通道起名。
Set Pressure Limit:为该通道设压力上限,或用默认值(最高 10 bar)。
Stop Pumps:在任何动作中停泵。
Initialize:初始化该通道。
Fill / Empty:注射器吸满 / 排空。
Dispense:排出指定体积后停止。只能从吸满状态开始,单次最多 7.5 mL。
Pump:按设定流速持续出液。
Timed:按设定流速出液一段时间。
Change Units:点流速单位,在 mL/min 和 µL/min 之间切换。
实时数据与日志
通过软件运行泵时,屏幕上实时绘出当前流速和当前压力。右上角显示 Autoscrolling 图标时,曲线持续滚动显示最新值。查看曲线时自动滚动会暂停,图标变成箭头,点击箭头恢复滚动。左上角橡皮图标清空曲线显示,已记录的数据不会删除。
数据同时记录在本机的日志文件夹中,文件夹位置可以自定义。左下角 Logs 标签显示日志内容,文件为 .CSV 格式,方便提取数据做图写报告。运行中随时可以点 Record a Note,在日志里打一条带时间戳的备注。例如 14:40 记一条「更换了样品浓度」,事后查找很方便。
自动进样阀:一次装样,分次注入
自动进样阀把进样环里的反应物注入 Sunshine 流路。反应物先用注射器注入进样环,运行时再一份一份自动注入液流。一次装样就能执行一系列独立的反应。
阀内有两个耐化学腐蚀的六通两位注射阀,各挂一个可更换的进样环。两个阀可以由软件独立或同时在装样(Fill)和注入(Inject)两个位置之间切换。
自动进样阀正面:绿色 LED 电源指示灯、加长 Luer 注样口、六通两位注射阀、PEEK 锥形接头(10-32)和下方的进样环。
首次使用前拆下运输螺栓
出厂时,模块底部装有两颗运输螺栓,把阀和进样环固定在底座上,防止运输中损坏和错位。配置模块前先拆下:逆时针用手拧出即可。螺栓留好,以后搬机还要用。
供电与通信
电源和通信接口都在背面。自动进样阀也有背面主电源开关和正面 LED 电源按钮两个开关,都打开才通电。在 Sunshine 和 Lite 上,自动进样阀的电源由自动收集器背面的短线串联供给。通信线同样是白色 RS232 转 USB 线。
两个阀位
阀按「后进先出」(Last in – First Out)设计:最后装进进样环的那部分样品最先注入系统。这样可以减少样品扩散,准确控制样品体积。
- 装样位(Fill):注射器经注样口的 Luer 接头向进样环装样(Fill → To Loop);进样环里多出的反应物从废液口排出(From Loop → To Waste)。泵送来的液体进阀后直接出阀,绕过进样环(From Pump → To Reactor)。
- 注入位(Inject):注射器直通废液口(Fill → To Waste)。泵送来的液体改走进样环(From Pump → To Loop),把样品推向下游(From Loop → To Reactor)。推送速度由系统流速决定。
左:装样位,泵来的液体绕过进样环直接去 Sunny;右:注入位,泵来的液体流经进样环,把样品推向 Sunny。
阀盘上印有同样的接口示意图,接管时可以直接对照。
装接进样环
进样环有 1 mL、5 mL 和 10 mL 三种,两个阀可以各用不同规格,例如左阀 1 mL、右阀 5 mL。Sunshine Single 使用 5 mL 进样环。进样环越大,能跑的实验越多、每次可用的反应物越多;润洗和冲洗时,冲洗进样环用的液体也越多,冲洗时间略长。
进样环体积:货号
1 mL:7206036
5 mL:7206037
10 mL:7206030
- 取一个所需体积的进样环。
- 放下自动进样阀的前门,露出阀盘。
- 握住样品托盘把手稳住阀盘,把进样环插到阀下方,体积标签朝前。进样环到位时会「咔嗒」一声卡住。
- 注样口已装好 Luer 接头,这个接头的死体积约 70 µL。
- 阀的接口是斜着错开排列的,免得拧接头时互相干涉。接头为 10-32 螺纹配锥形卡套,拧时确认接头已拧牢。
- 连接进样环两端:左侧管接 To Loop 口,右侧管接 From Loop 口,两个阀都一样。
进样环的两根管分别接阀上的 To Loop 口和 From Loop 口。
阀上其余的口用定标管路接。管路已按体积标定,接头和卡套都已装好,标签写明了接到哪里:
袋号 / 标签 / 数量
4.A:标签 进样阀 1 到 Sunny 1 入口;数量 1
4.B:标签 进样阀 2 到 Sunny 1 入口;数量 1
2:标签 进样阀到废液;数量 2
- 进样阀 1:4A 接 Sunny 入口,2 号管接废液;进样阀 2:4B 接 Sunny 入口,2 号管接废液。
- 两根废液管接到自动收集器附带的废液瓶。
- 两个阀的每个接头都拧紧到位。
- 写着 To Sunny 1 Inlet 的两根管要接到线性连接器上,再通往 Sunny,见第 4 篇。
- 接好后,可以把阀盘推回模块。模块两侧有小管夹固定管路,阀盘推进去后就能合上前盖,收纳整齐。
更换进样环
实验需要不同体积时,可以随时换进样环。换完后先运行一次 Sunshine Prime,确保流路里没有残留气泡,再开始实验。
- 把阀盘从模块中拉出。
- 从 From Loop 和 To Loop 两个口拆下接头。
- 把进样环从底座拔出。换下的进样环装进干净的无菌袋保存。
- 把新进样环插入,直到卡住。
- 重新接好接头。
- 润洗系统。
正确装样:先润洗,算上 70 µL 死体积
进样阀既可以在设备模式下单独操作,也可以由自动方案控制。使用前先做三件事:
- 对照模块上的示意图,确认阀和进样环的接管正确。
- 在 Sunny Suite 里输入实际装上的进样环体积,数值照进样环标签填。换了进样环一定要同步修改,软件靠这个数计算系统里剩余的样品量。
- 在软件里把阀设到装样位。开机时两个阀默认都在装样位。
进样阀控制面板:左下填 V1、V2 进样环体积,右侧切换两个阀的装样 / 注入状态。
每个阀都有加长的 Luer 接头,可以直接接 Luer 注射器。方案运行到装样步骤时会提示,届时把注射器里的反应物手动推进进样环。
装样前确认两点。
一是系统已经润洗,管路里的空气已排净。二是装样量算上了 Luer 接头约 70 µL 的死体积。
建议用无润滑剂的 Luer Lock 注射器,密封更好;Luer Slip 注射器也能用。实验运行期间注射器留在阀上,防止样品漏出。
- 通过方案运行进样阀时,软件会在流程中提示装样时机和每个进样环的装样量。
- 拔下注样口堵头,把 Luer 注射器插进注样口,旋转拧紧。
- 缓慢推动活塞,把样品推进进样环。推得太快容易带入气泡,样品也会和驱动液混得更多。
- 流速达到要求、实验可以开始时,方案自动把阀切到注入位。
- 实验结束后进样环会自动清洗,但 Luer 注样口要在换反应物前手动冲洗。Sunshine Single 软件会在流程中自动提示冲洗注样口。
- 实验和清洗全部完成后,装回注样口堵头,封住系统,防止污染进入或液体漏出。
用 Luer 注射器从注样口向进样环推注反应物。
清洗注样口,再用 Prime 冲洗整条流路
实验完成后要冲洗进样环,防止碎屑积累和交叉污染。自动润洗方案能冲洗进样环,但运行前建议先手动冲洗 Luer 注样口。进样环要定期冲洗:阻塞严重时,阀切到注入位那一刻液体进不了进样环,就会报过压。
- 泵装上干净溶剂、DI 水或其他清洗液。在两组配方之间清洗时,也可以直接用实验驱动液。另准备一支干净的 Luer Lock 注射器,吸 5 mL 同样的液体。
- 取下原来的注射器,用无尘洁净布擦净注样口外部。废液管有轻微液位压差,注样口可能渗出一两滴液体,这是正常的,一并擦掉。
- 注样口外部擦干净后,插上清洗注射器,在装样位用 2.5 mL 冲洗 Luer 接头。
- 在 Devices 窗口把阀切到注入位,用剩下的 2.5 mL 再冲一次。这样阀转子里的两条通道都冲到了。
- 另一个进样阀照此操作。
- 冲完后把两支注射器留在注样口上,封住接口,防止污染进入,直到下次实验。
- 在 Sunny Suite 中运行 Sunshine Prime 方案,用干净液体冲洗整条流路,包括进样环。
- 定期倒掉废液瓶里的废液,防止溢出。
出现这三种情况,检查进样环是否阻塞
- 意外过压:阀切到注入位那一刻,压力一路升到 10 bar 上限,系统停止。
- 手动装样费力:往进样环推液困难,或两个同体积进样环推起来用力明显不同。
- 运行时液体倒流进注射器:说明注入后系统压力不能顺畅泄到废液。
先按上面的步骤清洗阀和进样环。清洗无效、并确认问题只出在进样环上时,换一个新进样环。换后问题仍在,联系技术支持。
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