拿到 Sunshine，怎么从零搭起来跑实验

操作指南Sunshine 快速开机

拿到 Sunshine，怎么从零搭起来跑实验

刚拆箱的 Sunshine 是六个独立模块，从组装到跑完第一批 LNP 实验共 13 步。先组装硬件和接管，再准备驱动液、在软件里初始化和润洗，最后用 Excel 模板导入实验。

Sunshine 自动化了哪段流程

做核酸递送研发，要把水相（核酸载荷）和有机相（脂质前体）快速混合。混合要在毫秒级的时间尺度里完成，目标是得到粒径均一的脂质纳米颗粒（LNP）。要找到合适的工艺窗口，就得系统地扫流速比（FRR）和总流速（TFR）的组合。手动做既慢，批间也不稳定。

Sunshine 把整条流程自动化：两路反应物先装进进样环。四联注射泵从储液台抽驱动液（通常是 DI 水和乙醇；稀释液另走一路），把反应物推进 Sunny 微流控芯片汇合混合。自动收集器再一管一管接到预设的瓶位里。一次运行可以按 Excel 模板自动跑几十条实验，每条的 FRR / TFR / 稀释比可以不同。装好试剂按 Start，后续步骤由仪器自动执行。

Sunshine 整机外观：左起依次是储液台、两台四联注射泵、自动进样阀和自动收集器。

六个功能模块

Sunshine 由六个独立模块叠在一起。其中储液台和 Sunny 导轨不用电；两台四联注射泵和自动收集器各插一根电源线，自动进样阀由自动收集器背面引出的一根短线供电。这四个带电模块各用一根线接 USB hub。

• 储液台（Fluid Store）：一个带防漏托盘的开放式架子，最多能放 4 个 250 mL 的试剂瓶。瓶子里不加压，液体完全靠注射泵主动往外抽。瓶盖上有两个 1/4"-28 接口，用不到的那个要装上堵头防尘，不然空气进去会扰乱进液节奏。
• 四联注射泵（Quad Pump）×2：每台有两个独立通道。每个通道由一套阀体、一个压力传感器和一对注射器（5 mL + 2.5 mL）组成。两支注射器循环交替工作，这样才能保证连续出液不脉动。Pump 1 的通道 1A 抽水相驱动液，1B 抽有机相驱动液；Pump 2 的通道 2A 抽稀释液，2B 是手动备用，平时不用。
• 自动进样阀（Automated Sample Valve，ASV）：里面有两个独立的 6 通分配阀，叫 Valve 1 和 Valve 2。每个阀上挂一个进样环。实验前，操作者从前面板的 Luer 接口手动把反应物打进进样环。跑实验时，阀自动切换，把反应物送到 Sunny 芯片。
• Sunny 导轨 + Sunny 芯片：导轨（Sunny Mounting Rail）挂在自动收集器的正面，用来承载芯片。Sunny 芯片是实际做混合的那块玻璃微流控片。标准配置是 Sunny 490 Trident T。也可以换成 100 X、190 X、275 X、50 Micromixer、150 3D 等型号，Sunny 系列一共 9 种规格，完整清单见 Sunny 数据手册。
• 自动收集器（Automated Collector）：顶部的 X-Y 机械臂上挂着三通阀和收集针。下方是可以更换的瓶架，有 2 mL、8 mL、15 mL 三种规格。机械臂把收集针移到目标瓶位，三通阀决定液体是走废液还是走收集针。

模块堆叠成最终形态后的位置关系。日常使用只从正面操作。

液流路径概览

接管之前先看清整条液流的路径，后面每根管的两端接哪里，都能从这张图上找到。

Sunshine 流路示意图。驱动液从储液台经四联注射泵推出。它把进样环里预装的水相 / 有机相反应物送进 Sunny 芯片混合，再经三通阀分流到瓶架收集。

跑一条实验的时候液体是这样走的：

• Pump 1 的通道 1A 从储液台抽水相驱动液，推到自动进样阀的 Valve 1。
• Pump 1 的通道 1B 从储液台抽有机相驱动液，推到自动进样阀的 Valve 2。
• 进样环 1 装在 Valve 1 上，里面预先打好了水相反应物。驱动液把水相反应物顶出来，沿 4A 管送到 Sunny 芯片。
• 装在 Valve 2 上的进样环 2 里是有机相反应物，同样被顶出来沿 4B 管送到 Sunny 芯片。
• 两股液流在 Sunny 芯片的混合结上汇合，瞬间混合完成：LNP 就是在这里形成的。
• 如果这条实验开了稀释，Pump 2 的通道 2A 会同步从 4D 管往芯片下游注入稀释液，在线稀释。
• 混合产物沿 4E 管流到自动收集器的三通阀。液流刚开始和快结束那两段不稳定，三通阀把它们导向废液口；中间稳定的那段才导向收集针。
• X-Y 机械臂把收集针移到这条实验对应的瓶子上方，液体滴进瓶里。

第 1 步：模块堆叠

先把六个模块按最终位置摆到台面上，接管时就不必再挪动这些大件。

• 把四联注射泵 1 放到台面最左边。
• 把储液台叠在 Pump 1 顶上。储液台是开放式托盘，无需固定。
• 把四联注射泵 2 放到 Pump 1 右边。
• 把自动进样阀放到最右边。放之前先把它底部的运输螺栓拆掉（详情看下面的警示框）。
• 把自动收集器叠到自动进样阀顶上。

⚠ 先拆掉自动进样阀的运输螺栓。把自动进样阀放到台面或其它模块上之前，一定要先翻过来拧下底部这对螺栓。未拆螺栓就通电，托盘会卡死并损坏。这对运输螺栓（transit bolts）出厂时锁在底部，从下面固定进样环托盘，防止运输过程中窜动。拆下的螺栓单独放一个袋子收好，以后仪器要搬动还得用回去。

第 2 步：储液台装液

储液台里要放三个瓶子：水相驱动液、有机相驱动液和稀释液。不用稀释功能的话第三瓶可以省掉。每瓶 250 mL。

驱动液负责把进样环里的反应物推到 Sunny 芯片，本身不参与反应。典型组合是 DI 水推水相、乙醇推有机相。稀释液（如缓冲液）不经过进样环，由 Pump 2 直接注入芯片下游。

每个瓶子都这样装：

• 拧开瓶盖。
• 把过滤好的驱动液倒进去。驱动液提前用 0.22 µm 过滤器过滤。第一次开机推荐每瓶倒 150 mL 以上，润洗时才够用。如果装了选配的 10 µm PTFE 内嵌过滤器，液面要高过过滤器顶端。
• 盖紧瓶盖。瓶盖上有两个 1/4"-28 接口，其中一个接吸液管，另一个要装堵头，堵头随瓶子一起提供。没装堵头的话空气会漏进去打乱进液节奏。
• 把吸液管接到瓶盖上。吸液管是套件里标了 1A / 1B / 2A 的那几根粗管（1/8" OD × 1.5 mm ID）。先接好瓶子这头，另一头先悬着。等下一步装好注射泵，再接到泵上。
• 把瓶子放回储液台托盘里坐稳。

瓶子和泵通道的对应关系：

• 水相驱动液瓶 → Pump 1 通道 1A
• 有机相驱动液瓶 → Pump 1 通道 1B
• 稀释液瓶 → Pump 2 通道 2A
• Pump 2 通道 2B 是手动备用通道，标准实验下不接瓶

第 3 步：装四联注射泵

接下来装两台四联注射泵。每一台都要做同样几件事：塞注射器、把阀体装回去、接上下游的两根管。装好后泵本身就位了，但先不通电，电要等所有硬件都搭完再一起接。

四联注射泵正面：顶部绿色按钮为电源；中间可拆模块为阀体加压力传感器，由手拧螺丝固定；下方两个通道口接注射器对。

从 Pump 1 通道 1A 开始，每个通道都按下面这六步做：

• 拆下阀体组件。拧松通道下方的手拧螺丝。整块阀体加压力传感器就能向前抽出来，用手直接拔，不需要工具。
• 润湿活塞。注射器活塞先用 DI 水润一下再塞进套筒。干塞会把密封圈磨出毛刺，几小时后就开始渗液。这一步不能省。
• 装注射器。5 mL 那支（标 L）装到阀体的进液侧，2.5 mL 那支（标 R）装到阀体的出液侧。L / R 指阀体本身的进出液通道，与操作者站的方向无关：阀体正对自己时，进液口在左、出液口在右。装反了软件会报错，方案无法启动。
• 把阀体装回去。整块组件推回泵体到底，再把手拧螺丝拧回去。用手指拧到顶住即可，不要用扳手加力：FFKM 密封圈受压过大会变形漏液。
• 接上游的吸液管。第 2 步从瓶盖引出来的那根吸液管，另一头接到当前通道的 Valve Input 端口。
• 接下游的出样管。从 Valve Output 端口引出一根细管（1/16" OD × 0.8 mm ID）。它是套件里标号 3 的那根，标签写着 Injector Pump 1 to Sample Valve 1。这根管的另一头先空着，等第 4 步装完进样阀再接过去。

通道 1A 做完，按同样的流程做 1B。吸液管换成 1B 那根，出样管换成标签写着 Pump 2 to Sample Valve 2 的那根。注意这个标签上的 Pump 2 指自动进样阀上的 Valve 2，不是四联注射泵 2。

Pump 1 整台做完，挪到 Pump 2 前面。Pump 2 只装通道 2A 一个通道：吸液管接稀释液瓶，出样管用标号 4D 的那根（不是 3）。出样管另一头先悬着，等第 5 步直接接到 Sunny 芯片的稀释口上。通道 2B 什么都不装，它是手动备用通道，跑标准自动实验用不上。标准实验不用 2B，空置可减少磨损和漏液点。

⚠ 运行方案时不要触碰注射器。泵一开始工作，注射器组件就会上下高速运动。这时伸手去碰注射器或它和泵体的连接位置，很容易夹到手。任何时候想调整什么东西，先回软件把方案停下来。

第 4 步：装进样环和 ASV 接管

这一步先把两个进样环装进自动进样阀顶部的托盘，再接好自动进样阀上下游的几根管。

自动进样阀特写：6 通分配阀、10-32 锥形接头、进样环，以及前面板用于手动注样的 Extended Luer Fitting。

自动进样阀上所有液路接头都是 10-32 锥形接头（PEEK Conical Fitting），而且接头位置是斜着偏角布置的。拧的时候要顺着螺纹角度进，指尖能感觉到密封就停，别加力。拧得过紧会压坏 ferrule，之后就拆不下来。

• 装进样环。把进样环往托盘里一插，管口朝外，听到"咔哒"一声就到位了。然后把管口轻轻往外拉一点点留出余量，这样后面接到分配阀上时管子不会被拉紧或者拗折。
• 把进样环两头接到分配阀上。按自动进样阀前面板内侧贴的那张流路示意卡片接到 To loop / From loop 两个端口。
• 接泵到自动进样阀之间的管。第 3 步从 Pump 1 的 1A、1B 两个通道各引出一根出样细管。把通道 1A 那根接到 Valve 1 的 from Pump 端口。把 Pump 1 通道 1B 那根接到 Valve 2 的 from Pump 端口。
• 接废液管。套件里有两根标号 2 的管。把它们分别从两个分配阀的 To Waste 端口接出来。用自动收集器侧面的管夹固定一下，最后汇到废液瓶里。

分配阀两种位置：Fill 位置时泵推液体经进样环流到废液（装样和润洗时使用）；Inject 位置时泵推液体经进样环送到 Sunny 芯片（实验运行时使用）。运行时软件自动切换这两个位置，无需手动干预。

第 5 步：装 Sunny 芯片到导轨上

现在装 Sunny 芯片：把芯片夹进顶部接口、接上四根定标管、再把整套挂到 Sunny 导轨上。定标管路套件出厂时已按标准配置预组装好两个部件：线性连接器（Linear Connector，货号 7206043）和顶部接口（Sunny Top Interface，货号 7206095）。

Sunny 490 Trident T 装进顶部接口后的样子。四个接头分别对应两股反应物进样（4A、4B）、一路稀释液（4D）和一路混合产物输出（4E）。

线性连接器上有四个端口，对应四根标好号的定标管：

• 4A 管，水相反应物进样。从自动进样阀 Valve 1 的 To Reactor 端口接到线性连接器最下面那个进样口。
• 4B 管，有机相反应物进样。从自动进样阀 Valve 2 的 To Reactor 端口接到线性连接器再上一格。
• 4D 管，稀释液。从 Pump 2 通道 2A 的 Valve Output 端口接到线性连接器的稀释口。
• 4E 管，混合产物输出。从 Sunny 芯片的输出端经线性连接器引出来。另一头接自动收集器三通阀的侧口，留到下一步再接。

俯视 Sunny 490 Trident T 的四根流路管：4A 和 4B 从两侧进入，4D 从右侧进入，4E 从顶部离开。

四根管都接好之后，把 Sunny 芯片夹进顶部接口：

• 松开顶部接口上的四颗手拧螺丝，把上盖撑开一点缝隙。
• 把芯片平放进去。让芯片上的进出口对准黑色 FFKM 密封圈下方的孔位。芯片是有方向的，按出厂预设的方位放：输入端朝向两根 4A / 4B 管来的那一侧。
• 对角顺序交替拧紧四颗手拧螺丝。四颗交替着一圈一圈加力，别把一颗拧到底再拧下一颗。这样密封圈才能在芯片表面均匀受压。用手指拧到位即可，不要用工具。

最后把整套芯片挂到 Sunny 导轨上：

• 把顶部接口推进 Mounting Plate 的卡口（单芯片版货号 7206094，双芯片版 7206141）。里面有球弹簧会自动咬住，听到"咔嗒"一声就锁定了。
• 再把 Mounting Plate 正面对准自动收集器正面的 Sunny 导轨水平推进去，同样听到"咔嗒"一声就卡到位了。

第 6 步：装收集器三通阀和废液

这一步先接好自动收集器的三通阀，再把所有废液管汇到同一个瓶子里，最后装上收样品的瓶架。

三通阀挂在自动收集器顶部的 X-Y 机械臂上。每条实验的头尾过渡段，它把液体导向废液口；中间稳定段，它把液体导向收集针。底部的收集针出厂已装好，无需调整。

三通阀挂在自动收集器的 X-Y 机械臂上，可随机械臂移动到任意瓶位上方。

• 接 4E 管到三通阀的侧口。就是上一步从 Sunny 芯片输出端引出来的那根管的另一头。
• 接废液管到三通阀顶口。把套件里标号 2 的那根管从三通阀顶口接出来。用自动收集器侧面的管夹固定一下，最后汇到废液瓶里。

三通阀特写：顶口接废液，侧口接 4E 管（来自 Sunny），底部是预装的收集针，下方是装好瓶子的瓶架。

除了三通阀这根废液管之外，还有两路废液也要汇到同一个瓶子里：

• 第 4 步装进样环时引出的那两根废液管。标签是 Sample Valve 1 To Waste 和 Sample Valve 2 To Waste，都接到同一个废液瓶盖上。
• 自动收集器清洗托盘的那根 Tygon 管。标签是 Collection Waste。把它从托盘底部的快接接口引出来，接到废液瓶盖上的倒钩接头。每次冲洗收集针的废液都走这根管。

自动收集器下方的 Collection Waste 管：从清洗托盘底部的快接接到废液瓶盖的倒钩。

四路废液（三通阀、两路自动进样阀、Collection Waste）全部汇到同一个废液瓶里。

• 装瓶架。根据接下来要跑的实验体积，挑对应规格的瓶架插到收集器里。可选 2 mL（35 瓶，5×7）、8 mL 或 15 mL（都是 20 瓶，4×5）。瓶架规格要和软件 Devices 面板里的 Rack Type 设置一致。不一致的话，机械臂会按错的位置走，收集针可能戳偏。

第 7 步：通电和 USB

硬件全部就位后，接电源线和通信线。

• 接电源线。两台四联注射泵和自动收集器背面各插一根电源线。自动进样阀不用单独接电源，用随机附带的一根短线从自动收集器背面取电。
• 接 USB 通信线。每个模块的 USB 线都汇到那只配套的 USB hub，hub 再接到 PC。两台四联注射泵和自动进样阀用白色串口线，自动收集器用黑色串口线。
• 打开后面板的摇杆开关。每个带电模块（包括自动进样阀）都有两处电源开关：背面一只摇杆，正面一颗绿色按钮。背面的摇杆只在第一次安装时打开，之后就不用再动；日常开关机全靠正面那颗绿色按钮。
• 按正面绿色按钮开机。绿灯亮起就说明这个模块已经就绪。

组装完成后的 Sunshine：背面电源和 USB 线汇总到仪器后方，正面只剩流路管和储液瓶。

第 8 步：在软件里识别硬件

硬件接好后，打开 Sunny Suite Software 识别硬件，并告诉软件装了什么规格的瓶架、进样环多大。这两个参数必须和实际硬件一致。否则后面 Excel 模板的容量校验过不了，实验就跑不起来。

• 打开 Sunny Suite Software，切到 Devices 标签页。所有通过 USB 接进来的模块都会列在这一页。
• 选瓶架规格。打开自动收集器卡片的 Info / Settings。把 Rack Type 下拉菜单改成实际插入的那一种（2 mL / 8 mL / 15 mL）。选错的话，机械臂会按错的瓶位间距走，收集针可能戳到瓶架的钢板上。
• 填进样环体积。在自动进样阀卡片的 V1 Loop Volume 和 V2 Loop Volume 两栏，分别填实际安装的进样环体积。可选 1 mL / 5 mL / 10 mL，默认 5 mL。

Devices 面板的自动收集器设置：Rack Type 下拉选实际装入的瓶架规格。

Devices 面板的 ASV 设置：V1 和 V2 Loop Volume 分别对应两个进样环。

设备没出现在 Devices 列表里？先查 USB hub 有没有通电、对应模块正面绿灯有没有亮。再查串口线插稳没有：白色线给两台四联注射泵和自动进样阀，黑色线给自动收集器。三样都正常还是没出现的话，重启 Sunny Suite Software。

第 9 步：系统初始化

Sunshine 每次通电后，第一件事都得跑一遍 System Initialize。它把所有注射器、分配阀和自动收集器的机械臂复位到初始位置。它还会把注射器里的残液全部排空。初始化完成之前，软件不允许运行其它方案。

Protocols 面板里 Sunshine 的三类方案：System Initialize、System Prime 和 Development。橙色锁头是出厂默认方案（只读），绿色锁头是从默认克隆或从 Excel 导入生成的可运行方案。

• 打开 Protocols 面板（软件左下角），选 Sunshine System Initialize → Default。
• 设 Apparatus（设备映射）。左边列着软件里的几个逻辑功能（Input 1 pump、Input 2 pump、Dilution pump、Automated collector、Automated sample valve）。把它们一条条绑到对应的实际硬件上。设过一次软件就会记住，直到 PC 和硬件断开为止。
• 选 Dispense Flow Rate Level（分液流速档位）。按导轨上当前安装的 Sunny 芯片型号选择： > 档位 每通道流速 适用 Sunny 芯片 > > Slow 2.5 mL/min Sunny 100 X、Sunny 50 Micromixer > Medium 5 mL/min Sunny 190 X、Sunny 150 3D > Fast 7.5 mL/min Sunny 275 X、Sunny 490 Trident T 如果同时装了两种不同型号，按更慢那一种选。用的是新型号或自定义芯片表里没列的，先试 Medium，过压报警再降到 Slow。下一步要做的管路冲洗那会儿芯片还没装回去，下游没有阻力，可以直接选 Fast。
• 点 Save 保存，再点 Start 启动初始化。整个过程一两分钟，注射器复位到 home 位置后就会停。

系统初始化方案的配置页面：左侧 Apparatus 和 Parameters，右侧执行控制区。

⚠ 稀释泵也会被初始化。不管这次实验用不用稀释，初始化都会同时驱动 Pump 2 通道 2A。如果当前流路没有把稀释泵接到 Sunny 芯片上，要先处理稀释泵的出口。启动初始化前，把它（4D 管）临时导到一个废液容器里。否则液体会喷到台面。近期不用稀释功能的话，可以把 2A 的吸液管从瓶中拔出、注射器拆下收好，减少磨损。

第 10 步：首次开机的管路冲洗

这一步只有第一次开机要做。平时日常使用（没换过管路）直接跳到第 11 步。

出厂管路里可能有一点装配过程留下的灰尘。第一次跑实验时，灰尘会被冲进 Sunny 芯片，堵住通道。所以先从顶部接口里取出芯片，让管路下游直接通到废液烧杯。跑一次 Sunshine Prime 把管路冲干净，再把芯片装回去。

• 取出 Sunny 芯片。松开顶部接口的四颗手拧螺丝，把芯片拿出来用洁净纸巾包好放一边，注意别碰到芯片表面。
• 把线性连接器的开口端放进废液烧杯里。如果用的是双 Sunny 配置，稀释口那边的线性连接器也一起放进烧杯。
• 检查储液瓶。水相、有机相、稀释液三个瓶子里都要有至少 150 mL 干净过滤过的 DI 水或者溶剂。
• 克隆一份 Sunshine Prime 方案。在 Protocols 面板选 Sunshine Prime，在橙色的 Default 上点右键克隆一份，进到克隆出来的那个绿色方案。Apparatus 和上一步一样填。Parameters 里两个地方要改： - Dispense Flow Rate Level 选 Fast。管路里现在没有芯片，下游没有阻力，最快档冲洗最充分。 - Dilution Pump Priming：稀释泵接到 Sunny 的选 Yes，没接的选 No。
• Save → Start。方案跑完，管路里就充满了清洁的驱动液。
• 把 Sunny 芯片装回去。按第 5 步的流程把芯片夹回顶部接口（对角拧紧四颗手拧螺丝），线性连接器也复位。

第 11 步：装芯片状态下的正式润洗

芯片装回去之后再跑一次 Sunshine Prime。这一次要让整条流路（现在包括芯片）从"有空气"变成"充满液体"。同时把芯片入口附近的气泡冲掉。方案配置和上一步几乎一样，只有一处要改：

• 克隆一份 Sunshine Prime 方案（也可以复用上一步克隆的方案，只改档位）。
• Dispense Flow Rate Level 这次要按实际安装的 Sunny 芯片型号来选（对照第 9 步那张表）。装的是 Sunny 490 Trident T 就选 Fast，装的是 Sunny 100 X 就选 Slow。这次芯片在位，档位选错会触发过压保护。
• Dilution Pump Priming 按实际配置选 Yes 或 No。
• Save → Start。

方案跑完之后系统就是"干净、充满驱动液、可以马上跑实验"的状态了。

什么时候需要重新跑一次 Prime？第一次开机要跑，仪器闲置超过 24 小时重新启用的时候也要跑。换驱动液要跑两次。先把吸液管从原来的瓶子里拔出来插在空气里，跑一次 Prime 把系统抽成空的。再插到新瓶里跑一次 Prime，把新液灌进来。

第 12 步：跑第一批实验

Initialize 和 Prime 都跑完后，就可以开始跑实验。Sunshine 的实验参数通过一份 Excel 模板导入，不在软件里一条条点。实验矩阵在这份模板里规划，软件也直接用它作为运行输入。整个流程走五个阶段。先从软件导出 Excel 模板，再在 Excel 里依次填 User Inputs 和 Experimental Table。然后把改好的文件导回软件，最后装瓶、按 Start、手动注样。

阶段一：导出 Excel 模板

• 选 Sunshine Development → Default 方案，点上方工具栏的绿色 Excel 图标。软件会把实验导入模板导出为一个 xlsx 文件。
• 选保存位置，用 Excel 打开。模板包含三张工作表：Instructions（使用说明）、User Inputs（全局设置）、Experimental Table（实验矩阵）。

阶段二：填 User Inputs

User Inputs 标签：选 Sunny 型号、进样环体积、是否使用稀释、冲洗等级、瓶架规格。选完后右侧会自动画出对应的流路配置示意图。

几个关键字段：

• Sample Loop Volume：Loop 1 和 Loop 2 各自的体积，要和第 8 步 Devices 面板里填的一样。
• Sunny Set Up：导轨上实际安装的 Sunny 芯片型号。
• Collection Rack Code：瓶架规格，同样要和第 8 步一致。
• Dilution：这一批实验里只要有任何一行用了稀释就选 Yes，不用稀释的行把 Dilution 流速比设成 0。
• Wash Level：每条实验之间用驱动液冲洗 Sunny 和管路的强度，共分三档。 - Light：冲洗量最少，省驱动液但有残留风险，只适合连着跑同一组配方。 - Standard：默认推荐，适用于大多数实验。 - Extensive：加大冲洗量，连续跑配方差异大的实验时用，避免串扰。

填完之后，对照右边自动生成的流路配置示意图，一根管一根管核对过去。和实物接线对不上的，先回头调整接管或修改 User Inputs。都对上了再往下走。

阶段三：填 Experimental Table

Experimental Table 标签：每一行是一条独立实验，定义流速比、总流速、收集体积等参数。M 列 Row Status 实时校验每行合法性。

常用字段：

• Collection Vial：这条实验收集到第几号瓶子里。
• Flow Rate Ratio：Input 1、Input 2、Dilution 三列组成的流速比。常见 LNP 配方水相：有机相 ≈ 3:1，稀释那一段按需要填 0–10。
• Total Flow Rate (µL/min)：总流速。入门推荐从 12,000 µL/min 起步，再根据芯片类型上下调。
• Collection Volume (µL)：实际进瓶子的体积。
• Head cut / Tail cut (µL)：头尾丢弃量，用来排掉液流不稳定的过渡段。默认各填 100 µL就够用。总流速很低（< 5,000 µL/min）时可以减到 50 µL；芯片是 Sunny 50 Micromixer 这种小通道时建议加到 150-200 µL。
• Input 1 / Input 2 / Experiment Metadata：这几栏是实验描述，填 mRNA、Lipid mix A、Test 1 之类的文字。这些文字会写进结果文件，方便追溯。

右边的 Row Status 列会一边填一边校验。VALID 代表这行合法能跑。INVALID 代表超出了系统限制，比如每通道注射泵最大 10 mL/min、进样环剩余体积、瓶子容量之类。EMPTY 表示这行还没填。

INVALID 示例：第 6 行同时违反两个约束。一是总流速要求 Pump 1 以 12,000 µL/min 运行，超过 10,000 µL/min 上限。二是这批实验合计需要 5,100 µL 反应物，超过 5 mL 进样环的容量。

把所有红色行都改到 VALID 之后，另存为一个新文件。从软件里导出来的原始模板是只读的，直接按 Save 会报错。

阶段四：导入 Excel 生成可运行方案

• 回到 Sunny Suite Software，在 Sunshine Development 下面那个橙色 Default 方案上点 Import from Excel，选刚才另存的 xlsx 文件。软件会根据这份 Excel 生成一个新的绿色可运行方案。
• 点进去逐项检查一遍： - Description：核对 Sunny 型号、Fluidic Configuration、实验数是不是和 Excel 里填的一致。 - Apparatus：看看每个功能是不是都绑到了正确的硬件上。 - Fluidic Configuration Selected：对照一下实物流路。 - Experimental Table Parameters：点 View 会弹一个窗，里面是每行实验的完整参数，再翻一遍确认没填错。

从 Excel 导入得到的方案。Description 显示 Sunny 型号和实验数；Apparatus 与初始化 / 润洗一致；Experimental Table Parameters 里点 View 可翻看每行实验参数。

阶段五：装瓶、启动、手动注样

• 装收集瓶到瓶架上。瓶架的编号顺序要和 Excel 里 Collection Vial 列一致：软件就是按这个编号把液体送到对应瓶子里的。
• 选运行模式。在 Execution Control 区选 Run all Experiments（跑完整张表）或者 Run from Experiment（从指定的某一行开始）。
• 点 Start。软件先弹出对话框，确认储液瓶里驱动液够用、实验数量无误后，点 OK。注射泵开始 fill。
• fill 完成后会再弹出对话框，提示手动把反应物注入两个进样环。拿两支 Luer Lock 注射器，从自动进样阀前面板上的两个 Extended Luer Fitting 端口分别注射。水相反应物打进 Loop 1，有机相反应物打进 Loop 2。每个 Loop 的注样量等于这一批实验里所有行对应 Input 总量之和。软件会直接显示具体数值。
• 两个 Loop 都打好之后回软件点 OK。之后的分配阀切换、流速控制、头尾切换和瓶位移动，全部由软件和机械臂自动完成。屏幕上会显示当前跑到第几条实验（比如 003/008），以及这一条实验当前进行到哪一步（filling / injecting / collecting / washing）。

手动注样有两处易错点：

一是装错 Loop。两个进样环只靠上下位置区分，出厂没有标签。装错会使两相反应物对调，整批实验作废。建议第一次用的时候就在自动进样阀前面板上贴个小标签（"上：水相"、"下：有机相"）。

二是推得太快。推注射器要平稳匀速，大约 0.5–1 mL/s 的速度。推得太快会在进样环里产生气泡。看到液体从 To Waste 端的废液管开始流出来，就说明进样环已经装满，可以停了。

第 13 步：实验后收尾

一批实验跑完，还有几件事要手动收尾：取瓶、处理废液、清洗、关机。Sunshine 在每条实验之间都会自动用驱动液冲一次 Sunny 和管路，冲多少由 Wash Level 设定。所以跑完时流路已经冲过一轮，收尾时的清洗量不大。

取瓶和处理废液

• 从瓶架上把收集瓶取下来。按瓶号一一对应到实验记录里，贴好标签之后放进冰箱或者直接送去做后续表征。
• 检查废液瓶。四路废液都汇到这里，一批实验下来累积量可能不少。容量过半就倒掉换新瓶。

日常清洗：再跑一次 Prime

日常清洗最简单的做法就是再跑一次 Sunshine Prime，这个方案本身就是清洗方案。它会用当前驱动液把整条湿润流路冲一遍：注射器 → 定标管 → 进样环 → Sunny 芯片 → 三通阀。每次实验跑完都做一次，反应物就不会在管路里停留过夜。Prime 大概会消耗 1.5 倍进样环体积的驱动液，5 mL Loop 大约每瓶消耗 7-8 mL。启动前先看一下储液瓶里余量够不够。

深度清洗：换清洁剂跑 Prime

要是连续几天密集用、或者准备换完全不同体系的反应物之前，建议做一次深度清洗。做法是临时把驱动液换成清洁剂，再跑一次 Prime：

• IPA（异丙醇）：最通用，乙醇和缓冲液体系都适用。
• 稀表面活性剂溶液（比如 0.1% Tween-20）：对脂质残留特别有效。
• 稀漂白水（1-5% 次氯酸钠）：跑过 RNA 的系统偶尔过一次，灭活残留的 RNase。用完之后一定要再用大量 DI 水冲一次。

深度清洗之后，记得再用日常驱动液（DI 水 + 乙醇）跑一次 Prime，把清洁剂冲出去。不然下一批实验会被残留的清洁剂污染。

注意一个 Prime 洗不到的地方：自动进样阀前面板的 Luer 接口。这两个手动注样用的接口，自动跑 Prime 不会冲到里面。跑 Prime 之前，先单独用注射器抽溶剂手动冲洗这两个接口。不然手动冲出来的残留会被带回干净的进样环里。

关机和长期不用

Sunshine 没有待机模式。日常关机就是跑完 Prime 之后，用正面的绿色按钮挨个把每个模块关掉，再关闭 Sunny Suite Software。背面的摇杆开关保持原样不要动。

超过一周不用的话，建议倒掉储液瓶里的日常驱动液，换成 20% 乙醇水溶液再跑一次 Prime。这样管路里最后留的就是 20% 乙醇，可以抑制微生物滋生。这个状态下可以放好几个星期。重新启用的时候先跑一次 Prime 把 20% 乙醇换回工作驱动液。

耗材更换周期

部件:推荐更换周期

定标管路（Calibrated Tubing）:3-6 个月

进样环（Sample Loop）:3-6 个月

Sunny 芯片:可重复使用，堵塞时按「Sunny 疏通」处理

注射器对（Syringe Pair）:6-12 个月

压力传感器密封圈:12 个月

四联注射泵阀体 / 压力传感器:12-24 个月

Unchained Labs 建议每年安排一次预防性维护（PM，货号 7206150）现场服务。服务时会把系统性能校一遍，顺便把该换的耗材补齐。

常见问题速查

• 四联注射泵或自动进样阀开不了机。 每个模块都有两处电源开关：背面摇杆 + 正面绿色按钮，两处都要在 ON 位置。先检查背面摇杆是不是被人关掉了。
• 软件 Devices 列表里找不到设备。 检查两台四联注射泵和自动进样阀是不是都用白色串口线接到 PC（经过 USB hub）。再检查自动收集器是不是用黑色串口线接到 PC。线插紧了、模块绿灯也亮了还是没识别，重启一下 Sunny Suite Software。
• 四联注射泵的注射器漏液。 可能是注射器没拧紧，或活塞已磨损。先把注射器拆下来，清洁烘干再装回去。要是还漏，直接换新注射器（货号 7206009），装新注射器记得用 DI 水润湿活塞再插。
• 自动进样阀不出液，反应物送不到 Sunny。 两种可能：一是管接错了位置，二是进样环只装了一半没满。先对照自动进样阀前面板内侧那张流路卡片，把接管位置核一遍。再看一下软件里 V1 / V2 Loop Volume 是不是跟硬件一致。还排查不出来的话，按用户指南故障表的做法，把方案设为 Wash System，用食用色素跑一遍，看液体走到哪一步断了。
• 瓶子里没收到样品。 最常见的原因是进样环没装好样（参考第 12 步里手动注样的两处易错点），或者三通阀的管接反了。先看 To Waste 端有没有出液，确认进样环真装进了反应物。再检查三通阀的 4E 管和废液管位置是不是对调了。
• 反应物到不了 Sunny 或者没有汇合。 检查定标管路有没有按 4A / 4B / 4D / 4E 的标号接到线性连接器对应位置。再检查 Sunny 芯片有没有放正、四颗手拧螺丝有没有对角均匀拧紧。芯片放反了或者没夹紧，两股液流就汇不到混合结那里。
• 收集针位置偏了，戳到瓶架旁边而不是瓶口。 X-Y 机械臂的坐标是按瓶架规格算的。先看软件 Devices 面板的 Rack Type 是不是和实际瓶架一致。再看 Excel 里 Collection Vial 编号对应的瓶子，有没有装到瓶架的对应位置上。
• 某处接头或管路漏液。 系统下游运行压力能到 10 bar，所有 10-32 接头都要拧到位（但不能拧过头）。先找到漏液的具体位置是哪个接头，重新拧紧：手指感觉到密封即可，不要用扳手加力。还漏的话就换接头或者换那一段管。
• 系统里没有液体，注射器吸不到。 驱动液是会随实验消耗的。先看储液瓶是不是已经空了。瓶子还没空，就检查吸液管是不是从瓶里掉出来了。再检查瓶盖上另一个没用的接口，看堵头是不是掉了导致漏气。三项都正常，就跑一次 Prime 重新润洗。

Sunny 芯片堵塞的专项处理

跑实验时出现过压报警（overpressure error），最常见的原因是 Sunny 芯片的混合结被堵住了。先试一下低速 Prime（Slow 档跑一次），多数情况下就能恢复。还堵的话就要手动反冲：

• 把 4E 管从三通阀上拔下来，端头接上配件里的 1/4"-28 Luer 转接头。
• 把 4A、4B、4D（如果有）都从自动进样阀或四联注射泵那一端拔开，另一头仍然连在 Sunny 上。把拔开的那头放进废液烧杯。
• 拿一支 Luer Lock 注射器吸满合适的清洗液：不溶物用水或乙醇，脂质残留用对应溶剂。从 4E 那一端反方向手动推，把堵塞物从混合结反冲出来。
• 有显微镜的话，冲完看一下混合结确认通畅了。

上面没覆盖到的故障，联系 Unchained Labs 技术支持：support@unchainedlabs.com。

• overview · Sunshine 是什么
• step-1-stack · 第 1 步：模块堆叠
• step-2-bottles · 第 2 步：储液台装液
• step-3-pump · 第 3 步：装四联注射泵
• step-4-loops · 第 4 步：装进样环
• step-5-sunny · 第 5 步：装 Sunny 芯片
• step-6-collector · 第 6 步：装收集器和废液
• step-7-power · 第 7 步：通电和 USB
• step-8-devices · 第 8 步：软件里认硬件
• step-9-init · 第 9 步：系统初始化
• step-10-flush · 第 10 步：首次管路冲洗
• step-11-prime · 第 11 步：润洗
• step-12-run · 第 12 步：跑第一批实验
• step-13-after · 第 13 步：实验后收尾
• step-14-faq · 常见问题速查