用户指南第 3 篇 · 共 7 篇
这一篇用定标管路把各堆叠单元、储液台和 Sunny 芯片连成一张流路网。样品沿这张网从 96 孔板吸进 2.5 mL 进样环,经 Sunny 混合,再送到收集板。管路接错端口,样品就不能正确吸进进样环,所以下面每一步都按管路标签和阀门端口号来接。组装前请先完成第 2 篇:堆叠单元与储液台的全部步骤。
自动移液模块(Fluid Handler)装在四联注射泵上方,两者合起来是一个堆叠单元,软件把这个组合当作整体控制。它在多个位置吸取和分配液体,内部装有分配阀门和进样环,实验中的试剂和样品都在这里暂存、转移。阀门出厂已装好,用户要装的是清洗池、针头和管路,而且要先装完这些,再接入管路网络。
图 19:Sunscreen 自动移液模块。
图 20:自动移液模块前盖打开状态。
# / 组件 / 功能
1:组件 机械臂;功能 控制 X/Y 轴移动,在 96 孔板上定位吸取或分配孔位
2:组件 移液头;功能 控制 Z 轴移动,将针头插入样品孔吸取或收集液体
3:组件 针头;功能 直接插入样品孔,连接后需通电用软件对准位置
4:组件 清洗池;功能 针头清洗位,防止实验间交叉污染
5:组件 孔板床;功能 定位并固定 96 孔板
6:组件 二通切换阀;功能 隔离进样环与针头的连接
7:组件 2.5 mL 进样环;功能 样品从孔板吸取后暂存于此,等待注入系统
8:组件 六通阀;功能 堆叠单元内部流体分配
9:组件 收集环路;功能 样品输送后暂存,再引导至收集板对应孔位
10:组件 管路夹;功能 固定进样环与针头连接管路,防止与机械臂移动冲突
清洗池在实验中和实验后冲洗针头,防止前后加样之间交叉污染。
图 21:将清洗池定位到自动移液模块。
图 22:将清洗池拧紧到自动移液模块。
针头安装在移液头上,由机械臂带动在 96 孔板上方移动,完成样品吸取和分配。这一步只把针头装到位,位置校准要等系统通电后在软件里做。
图 23:将针头插入自动移液模块。
注意:针头对准是在软件中完成的,需要系统通电。具体操作见第 4 篇:软件设置。
清洗池背面和自动移液模块背面各有一个外径 9.5 mm 的废液管接口,分别排放清洗池废液和孔板溢流废液。清洗池废液来自冲洗针头的液体,实验中做清洗循环时,这根管里通常有液体流过。孔板溢流废液来自孔板区溢出的液体,这根管里正常应当是干的;见到液体,说明孔板加得太满。前者进储液台内的 5 L 废液瓶,后者进溢流托盘。
图 24:将废液管插入清洗池。
图 25:废液瓶连接。
图 26:系统后部的废液管路连接。
图 27:废液瓶盖存储。
每根定标管路都有标签:数字开头的属于输入堆叠单元(1 或 2),C 开头的属于收集堆叠单元。阀门上的端口也有编号,自动移液模块上贴着端口示意标签,接线时可以对照。
重要:仅使用 Unchained Labs 原装定标管路。禁止切割或修改管路,非定标管路会影响体积精度和系统性能。
管路连接通用规则(适用于以下所有步骤)
- • 所有 1/4"-28 接头手紧即可,不要使用扳手或工具,过紧会损坏螺纹和密封面
- • 管路插入接口后应无松动感,轻拉不脱出
- • 管路不得折弯、扭曲或交叉缠绕
- • 以下 ①–⑥ 每一步都按管路标签对应到各自的堆叠单元,标签写的是哪个单元就接哪个
- • 建议用标签纸标记每根管路的来源和去向,方便后续维护
图 28:Sunscreen 管路示意图。建议打印此图放在手边,对照连接。
驱动液让系统充满液体、平衡压力,并把样品从孔板推到进样环、Sunny,最后经收集环路送到收集板。每个输入堆叠单元由一个供液瓶供液,经分叉管路接到四联注射泵的两条通道。Channel A 是系统泵(左侧),Channel B 是样品泵(右侧);收集堆叠单元的系统泵用作稀释泵。
堆叠单元 / 管路标记 / 连接
输入堆叠单元 1:管路标记 1F;连接 供液瓶 → Channel A 输入端
1G:供液瓶 → Channel B 输入端
输入堆叠单元 2:管路标记 2F;连接 供液瓶 → Channel A 输入端
2G:供液瓶 → Channel B 输入端
收集堆叠单元:管路标记 CF;连接 供液瓶 → 稀释泵输入端
CG:供液瓶 → 样品泵输入端
操作:将管路接头拧到供液瓶 GL45 盖的插入件上,手紧即可。管路末端应延伸到瓶底附近,以便吸取最低液位的驱动液。然后将管路另一端的接头拧到四联注射泵阀门的对应输入端口(Channel A 或 B)。
✓ 完成检查:轻拉每根管路,不脱出即可。确认 6 根管路全部连接(输入堆叠单元 1 × 2 根 + 输入堆叠单元 2 × 2 根 + 收集堆叠单元 × 2 根)。
图 29:供液瓶的输入管路连接。管路接头拧到瓶盖插入件。
图 30:系统泵/样品泵的输入管路连接。
图 31:样品泵/系统泵的输入管路连接。
图 32:四联注射泵的管路连接。
针头管路既负责从 96 孔板吸取样品,又在实验间通过清洗池冲洗。它一端接针头,另一端接自动移液模块左侧的二通切换阀(输入阀门)。接针头管路时,系统必须断电。
✓ 完成检查:手动将机械臂推到最远角位置,观察管路是否被拉紧或干涉。如有,调整管路夹位置或增加管路余量。
图 33:将管路拧紧到 XYZ 针头。
图 34:Sunscreen 阀门示意图。
图 35:输入堆叠单元上的管路夹和整理器。
进样环(Sample Loop)容量 2.5 mL。样品从孔板吸进来后先存在这里,再由驱动液推入系统。每个堆叠单元用一个,随系统提供。
✓ 完成检查:每个进样环的两端分别接在六通阀的 2 号位和 5 号位。
图 36:将 2.5 mL 进样环插入自动移液模块。
图 37:进样环连接到六通阀。
吸样时,样品先经过二通切换阀,它按吸样体积开关。一段定标管路把它接到六通阀,再由六通阀把进样环里的样品分配进系统。
收集堆叠单元上也有这两个阀门,但只用六通阀。它的二通切换阀已加堵头,不接管路。
✓ 完成检查:两个输入堆叠单元的二通切换阀 1 号位都已接到六通阀 1 号位,收集堆叠单元的二通切换阀保持封堵。
图 38:连接二通切换阀到六通阀的管路。
样品泵和系统泵就是 ① 里四联注射泵的两条通道,这两条通道都要接到六通阀。样品泵把样品从孔板吸进进样环,也负责冲洗针头:它把一定体积的液体经针头打进清洗池,针头内外都冲到。系统泵向系统注入驱动液,把样品从进样环推出去。
收集堆叠单元的稀释泵不接六通阀,它直接向 Sunny 供稀释液,接法见 ⑥。
图 39:六通阀到样品泵的管路连接。
图 40:六通阀连接到系统泵。
这是管路网络的最后一段。通往 Sunny 的管路末端已装好线性连接器,连接期间先把连接器放在擦净的台面上,减少灰尘进入系统、堵塞芯片。
图 41:线性连接器组装。
图 42:1E/2E 管路连接到六通阀。
图 43:输入堆叠单元 1 和输入堆叠单元 2 的完成连接。
图 44:配置收集/稀释堆叠单元的废液管路。
管路连接总检查
- ✓ ① 供液瓶管路:6 根(1F/1G/2F/2G/CF/CG)全部手紧到位
- ✓ ② 针头管路:1A、2A 接二通切换阀 2 号位,收集堆叠单元的接六通阀 6 号位;都已过管路夹,机械臂全行程无干涉
- ✓ ③ 进样环:两端接六通阀 2 号位和 5 号位
- ✓ ④ 1B、2B:二通切换阀 1 号位 → 六通阀 1 号位
- ✓ ⑤ 1C、2C、CA 接样品泵,1D、2D 接系统泵
- ✓ ⑥ 1E、2E 接六通阀 3 号位,CH 接稀释泵出口,CD 接 4 号位,CE 接 3 号位并通到废液瓶
- ✓ 所有管路无折弯、无交叉缠绕、无松动
所有 Sunny 都装进同样的顶部接口(Top Interface, PN 7206095),再用一个线性连接器(Linear Connector, PN 7206043)把管路接上芯片。换芯片时管路不用重接,只需换下接口里的 Sunny。
建议:首次配置时,先冲洗系统管路再安装 Sunny,避免管路残留物污染芯片。
标准配置含 Sunny 490 Trident T + Sunny 190 X + Sunny 190 T + Sunny 50 Micromixer。下表列出全部兼容型号:
Sunny 型号 / 零件号 / 集成稀释
Sunny 490 Trident T:零件号 7206119;集成稀释 是
Sunny 100 X:零件号 7206159;集成稀释 —
Sunny 100 T:零件号 7206160;集成稀释 —
Sunny 190 X:零件号 7206161;集成稀释 —
Sunny 190 T:零件号 7206165;集成稀释 —
Sunny 275 X:零件号 7206167;集成稀释 —
Sunny 275 T:零件号 7206168;集成稀释 —
Sunny 150 3D(原 5-Input):零件号 7206169;集成稀释 是
Sunny 50 Micromixer:零件号 7206166;集成稀释 —
标准配置使用 Sunny 490 Trident T:Input 1 接水相缓冲液(含载荷),Input 2 接脂质/溶剂,Input 3 接稀释液。
图 45:Sunny 490 Trident T,3 个输入端 + 1 个输出端,支持集成稀释。
线性连接器由三部分组成。翼形螺丝把连接器拧紧在接口上,黑色 FFKM 垫片压在芯片表面形成密封,管路夹卡住管路、防止脱开。
图 46:线性连接器组件构成:翼形螺丝、FFKM 垫片、管路夹。
图 47:管路插入线性连接器并固定。
Sunny 490 Trident T 的流体从垂直于芯片表面的方向进出,所以要靠顶部接口与线性连接器对接。组装全程在平整台面上进行,否则拧紧前芯片可能从接口里滑出。拿芯片要戴手套,并先清洁台面,减少污染和堵塞。
图 48:顶部接口。
图 49:线性连接器连接到顶部接口。
图 50:将 Sunny 组件安装到安装导轨。
图 51:完整的流体网络。
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