【Webinar】AAV 衣壳滴度、空满比、聚集，2 µL 一次测完

关于本次 Webinar

AAV 表征要看衣壳滴度、基因组滴度、空满比和聚集，常规做法是拆成好几个 assay。衣壳滴度用 ELISA，每个 serotype 都要单独开发；基因组滴度用 qPCR，序列特异、耗时几小时。空满比用 AUC 要等一天，cryo-EM 的成本又高。之所以要拆，是因为 AAV 是蛋白加 DNA 的复合结构：单做 DLS 测不到 DNA，单做 UV-Vis 又分不清颗粒和游离蛋白。DLS 和 nanodrop 分开做也有代价：折光指数假设只要偏 1.5%，浓度结果就能差 33%。

Stunner 新的 AAV Quant 应用在同一块 Stunner Plate 上同时采 UV-Vis、DLS、SLS 三路信号。只需 2 µL 样品，衣壳滴度、空满比和聚集就同步读出，单个样品不到 1 分钟。整个方法不需要标准品、抗体或 PCR 引物。多个 serotype 同板跑时，只要为每组样品输入衣壳尺寸、各衣壳蛋白的氨基酸序列和比例，以及 DNA 长度。64 个样品约 45 分钟跑完，装板之后无需人工操作。

Live Demo 里 Kevin 先讲原理，再实机走一遍完整流程：用反向移液把 2 µL 样品加到 Stunner Plate，在 Stunner Client 用 Excel 导入样品信息，然后启动测量。结果部分对比了 75% full、empty、aggregated 三个样品的差异。最后 15 分钟是 Q&A，共 14 个问题。样品经过纯化、滴度 >1×10¹² VG/mL 左右即可测，不需要额外处理。重复性方面，常规供应商样品的 CV 一般在 5-10%。其余问题涉及和 qPCR 的差异、多 serotype 同板、partial capsid 归类和 21 CFR Part 11 合规。

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