Stunner Plate:2 µL 样品怎么加才测得准

Stunner Plate:2 µL 样品怎么加才测得准

Stunner Plate 每孔只加 2 µL 样品,一次上机就测出 UV/Vis 吸光度和 DLS 粒径。6 条微流控 Strip 预装在黑色框架里,每个孔位连着 0.1 mm 和 0.7 mm 两个光程的微比色皿,所以样品不用稀释,0.03–275 OD 都在量程内。

一种板覆盖所有应用

正因为有两个光程,Stunner Plate 不分高浓度板、低浓度板,也不需要单独的板架,所有样品应用都用这一种板。

打开包装,6 条透明的 Strip 已预装在黑色塑料框架中,整板共 96 个加样孔位(6 条 × 16 孔)。板的侧面带条形码,软件扫码后自动关联样品信息,便于追踪。

外形尺寸遵循 SBS 标准,可以直接放进液体处理机器人的板位。板可以叠起来存放;装进托盘时一次只能放一块(见「装板与取板」)。

Stunner Plate 可堆叠存放,侧面条形码用于样品追踪。

6 条透明 Strip 预装在黑色框架中,每条 16 个加样孔。

Strip 的微流控结构

每条 Strip 有 16 个锥形加样孔,孔间距 9 mm(SBS 标准),多通道移液器和加样机器人都能直接对齐。

加样孔的底部连着一段毛细管通道,通向储液腔。样品滴入孔口后,毛细力立刻把液体吸进储液腔和蜿蜒通道。样品因此离开敞口环境,正常条件下加样后 2 小时内保持稳定、无蒸发。

储液腔的下游连着两个微比色皿,光程分别是 0.1 mm 和 0.7 mm。Strip 末端的排气孔与仪器内部的真空系统相连,测量时由真空驱动样品进入比色皿。

Strip 用 COC(环烯烃共聚物)制成,紫外吸收低,整个 UV/Vis 波段都可以透过它读吸光度。

上半部分:Strip 内部结构(加样孔、储液腔、微比色皿 0.1 mm + 0.7 mm、排气孔)。下半部分:四步测量循环。

测量循环

从加样到出数据,Strip 内部的过程分四步:

全部 UV/Vis 测量完成后,仪器再采集 DLS 数据;如果用的是 Stunner AF,荧光数据也在这一步采集。

仪器还实时监测比色皿的灌注。如果气泡阻断了液柱,或者样品量不足导致灌注不完全,软件会自动标记该孔位,不必等拿到数据后才发现问题。

两个光程怎么覆盖 0.03–275 OD

0.7 mm 光程测常规浓度范围,0.1 mm 光程测高浓度样品。换算成标准 10 mm 等效光程,Stunner 的 OD 测量范围是 0.03–275。

以蛋白浓度为例,消光系数按 1.0 算,275 OD 约对应 275 mg/mL 蛋白,所以高浓度制剂不用稀释就能直接上机。高 OD 段由 0.1 mm 光程测量。

参数:值

加样操作

Stunner Plate 每孔加 2 µL。加多了,储液腔装不下的部分留在加样孔里蒸发,样品浓度随之改变,结果波动变大。加少了,毛细管灌注不完全,比色皿里出现气泡。2 µL 是目标值,参数表里的 10%(1.8–2.2 µL)是可接受的偏差范围。

移液器和移液手法

用 0.5–5 µL 精密移液器,推荐反向移液(reverse pipetting)。吸液时按到第二档、释放时只按到第一档,余量留在枪头里丢弃,这样枪头里的气泡不会被吹进加样孔。

Spin-Mix-Spin-Load 四步法

加样角度很关键

枪头以 45° 角贴住加样孔的锥形内壁,缓慢释放,让液体沿壁面流入。枪头垂直插到孔底会强制灌注毛细管通道,产生气泡,干扰后续测量。

其他注意事项

装板与取板

装板时注意方向,A1 孔位在右上角。放好板后推入托盘,托盘关闭时前面板盖会自动盖上。

装板时 A1 在右上角(绿色方框标注位置)。

测量完成后,托盘会自动弹出。如果 30 秒内没有取板,托盘会自动收回,以保护样品。需要时,在软件里点 Open tray 重新打开托盘。

不要叠板

一次只能装一块板。在托盘上叠放两块 Stunner Plate 会损坏仪器。软件允许定义多板实验,请按软件提示逐块装入。

保质期与复用规则

Stunner Plate 的保质期是 18 个月(从生产日期起算)。过期后,Strip 内毛细管的自灌注性能不再有保证,样品可能吸不进去,或者灌注不均匀。

用过的孔位不能重复加样

没用完的孔位可以留着

不需要一次用完全部 96 个孔位,只要板还在保质期内,空着的孔位可以留到下一次实验继续使用。

### 下一步

→ 从打开软件到出数据