皮下注射的单抗常要在 1–2 mL 内给足剂量，制剂浓度往往需要达到 100 mg/mL 以上，高粘度随之成为开发难点。高浓度粘度测量需要数十毫克样品，变体筛选阶段难以满足。扩散相互作用参数（diffusion interaction parameter，kD）在 2–10 mg/mL 测定，每孔 2 µL。下面 3 项研究同时报告了 kD 和高浓度粘度，kD 都在 Stunner 上测定，粘度与其他读数来自各自的方法。
本组 6 篇论文中，Stunner 的用途各不相同。前 3 篇用 kD 研究粘度。后 3 篇没有报告蛋白溶液的高浓度粘度，见文末一节。
文献与单位 / 样品 / Stunner 测定 / 其他方法
Lefevre 2025，AstraZeneca:样品 一个高粘度 IgG1 及其突变体;Stunner 测定 kD;其他方法 微流控粘度计测粘度；AC-SINS 测自缔合；HDX-MS 定位热点；Lunatic 核定浓度
Kalejaye 2026，Stevens Institute of Technology、AstraZeneca、Brookhaven National Laboratory:样品 21 个 IgG1 单抗;Stunner 测定 kD;其他方法 Honeybun 测粘度；同步辐射小角 X 射线散射（SAXS）；Lunatic 测浓度
Paidi 2026，Genentech（bioRxiv 预印本）:样品 96 个 IgG1 抗体;Stunner 测定 kD;其他方法 锥板流变仪测粘度；PS-SINS 和 CS-SINS；计算分子描述符
Wang 2025，AstraZeneca、University of Colorado Boulder:样品 15 个单抗;Stunner 测定 kD;其他方法 微流成像计数亚可见颗粒；QCM-D 测界面吸附
Hong 2025，Roquette:样品 帕博利珠单抗、地舒单抗;Stunner 测定 kD、B22;其他方法 SEC 测聚集；差示扫描荧光测 Tm
Fischer 2024，AbbVie、Ludwig-Maximilians-Universität München:样品 4 个治疗性 IgG1 和 NIST mAb;Stunner 测定 UV/Vis 蛋白浓度;其他方法 色谱和荧光光谱评估氧化
Table 1. 六篇论文的样品与方法分工，均照各文 Materials and Methods 整理。
Lefevre 等研究一个内部 IgG1（mAb A）。它在 20 mM 组氨酸 pH 6.0、150 mg/mL 下的粘度为 69 cP，超过该研究设定的 20 cP 阈值。作者的工程改造以可逆自缔合（reversible self-association，RSA）为靶点。高浓度粘度测量需要数十毫克样品，因此先在低浓度下用 kD 和 AC-SINS 筛选变体，样品够用的变体再测粘度。
第一、二轮变体中，PBS pH 7.2 下测得的 kD 与组氨酸缓冲液中的粘度 Spearman ρ = −0.77。组氨酸中测得的 kD 与该粘度的 ρ = −0.72，p 均小于 0.0001。AC-SINS 与粘度的 ρ = 0.73。疏水作用色谱保留时间与粘度没有强相关。
分子 / 突变 / kD，His pH 6.0（mL/g） / kD，PBS pH 7.2（mL/g） / 粘度（cP） / 亲和力损失（倍）
mAb A:突变 母本;kD，His pH 6.0（mL/g） −31 ± 0;kD，PBS pH 7.2（mL/g） −31 ± 3;粘度（cP） 69;亲和力损失（倍） –
A.11:突变 HC W100A;kD，His pH 6.0（mL/g） −15 ± 0;kD，PBS pH 7.2（mL/g） −18 ± 0;粘度（cP） 11;亲和力损失（倍） 1.8
A.30:突变 HC F100dA F100eA;kD，His pH 6.0（mL/g） −7 ± 0;kD，PBS pH 7.2（mL/g） −15 ± 4;粘度（cP） 11;亲和力损失（倍） 6.7
A.7:突变 LC D51A;kD，His pH 6.0（mL/g） 2 ± 2;kD，PBS pH 7.2（mL/g） −11 ± 1;粘度（cP） 10;亲和力损失（倍） 不结合
A.9:突变 LC D53A;kD，His pH 6.0（mL/g） −17 ± 1;kD，PBS pH 7.2（mL/g） −23 ± 2;粘度（cP） 103;亲和力损失（倍） 1.0
Table 2. 摘自 Lefevre 2025 Table 1。粘度在 150 mg/mL、20 mM 组氨酸 pH 6.0、25 °C 下用微流控粘度计测定。kD 为三次独立实验、技术双复孔的均值 ± SD。
A.11 和 A.30 的粘度都降到 20 cP 以下，靶标亲和力分别损失 1.8 倍和 6.7 倍，仍在作者设定的 10 倍容忍范围内。
个别变体偏离整体趋势：A.9 的 kD 比母本高，粘度却升至 103 cP。
Kalejaye 等的 21 个 IgG1 都配在 20 mM 组氨酸 pH 6.0 中。kD 在 2–10 mg/mL 由 Stunner 测定，粘度在 150 mg/mL 由 Honeybun 测定。以 20 cP 为界，低粘度 14 个，高粘度 7 个。
kD 与粘度回归的 R = −0.78，R² = 0.60。以 −8 mL/g 为阈值，19 个单抗分类正确，准确率 90%。两个未分对的单抗都是高粘度分子：
单抗 / kD，2–10 mg/mL 拟合（mL/g） / 150 mg/mL 粘度（cP）
mAbA8:kD，2–10 mg/mL 拟合（mL/g） 5.36 ± 1.20;150 mg/mL 粘度（cP） 88.9
mAbB11:kD，2–10 mg/mL 拟合（mL/g） −6.98 ± 1.18;150 mg/mL 粘度（cP） 56.93
Table 3. 摘自 Kalejaye 2026 Table 1。
mAbB11 的结果取决于拟合范围。2–10 mg/mL 拟合得到 −6.98 mL/g，2–6 mg/mL 拟合得到 −10.98 mL/g，后者与高粘度相符。作者认为，这是扩散系数与浓度的线性关系在全范围内有偏离。其余单抗用 3 点和 5 点拟合的分类一致，按 2–6 mg/mL 重算后只剩 mAbA8 一个例外。
同一批样品还做了同步辐射 SAXS。作者把 ≤10 mg/mL 时低 q 区有效结构因子 Seff(q) 上翘的分子判为高粘度，21 个全部分类正确。10 mg/mL 下 Seff(q = 0.01 Å−1) 与粘度的 R = 0.94，R² = 0.89。
作者同时说明，本文目的不在于直接比较 kD 和 SAXS，数据集也较小。mAbA8 的 Seff(q) 只在 3 mg/mL 上翘，也可能属于 SAXS 的误判。作者还引述一项约 229 个抗体的研究，其中 kD 的粘度分类准确率约 80%。
Paidi 等的工作是 bioRxiv 预印本，未经同行评议。研究对象是 96 个 IgG1，主题是 PEG 稳定的自相互作用纳米颗粒光谱（PS-SINS）。kD 用 Stunner 测定，粘度用锥板流变仪在约 180 mg/mL、20 mM 组氨酸醋酸盐 pH 5.8 中测定。
作者以 15 cP 为界，用留一法训练随机森林二分类模型。只用计算描述符时，低粘度和高粘度两组的准确率为 66% 和 71%。加入 kD 和 PS-SINS 后升至 79% 和 86%。重要性分析中，PS-SINS 和 kD 是影响最大的两个预测量。
同一研究也构建了不含 kD 的模型。计算描述符加上 PBS 和 10 mM 组氨酸盐酸盐两种缓冲液的 PS-SINS，准确率为 76% 和 83%。文中没有单用 kD 的模型结果。
三项研究都按 D = D0(1 + kDc)，由扩散系数随浓度的变化得到 kD。稀释系列的配制和拟合步骤见《一组稀释系列，同时测出 B₂₂ 和 kD 两个聚集预警指标》。缓冲液粘度偏离水时，同一篇还介绍了用 Homebrew 实测粘度的做法。
条件 / Lefevre 2025 / Kalejaye 2026 / Paidi 2026
浓度:Lefevre 2025 2、4、6、8、10 mg/mL;Kalejaye 2026 2、4、6、8、10 mg/mL;Paidi 2026 2.0–10 mg/mL
每孔体积与复孔:Lefevre 2025 2 µL，双复孔;Kalejaye 2026 2 µL，三复孔;Paidi 2026 2 µL，三复孔
采集:Lefevre 2025 5 次，每次 4 s;Kalejaye 2026 5 次，每次 4 s;Paidi 2026 文中未写，25 °C
缓冲液:Lefevre 2025 PBS pH 7.2；20 mM 组氨酸 pH 6.0;Kalejaye 2026 20 mM 组氨酸 pH 6.0;Paidi 2026 20 mM 组氨酸醋酸盐 pH 5.8；200 mM 精氨酸琥珀酸盐 pH 5.8
计算输入值:Lefevre 2025 粘度 1.002 cP（PBS）、0.846 cP（组氨酸）；折射率 1.334；理论 E1%;Kalejaye 2026 粘度 1.002 cP（PBS）、0.846 cP（组氨酸）；折射率 1.334；理论 E1%;Paidi 2026 文中未写
加样与数据筛选:Lefevre 2025 文中未写;Kalejaye 2026 文中未写;Paidi 2026 自动移液工作站加样；0.22 µm 过滤；保留偏差 <10%、拟合平方和 ≤0.02 的数据
Table 4. 三项研究的 kD 测定条件，均照各文 Methods 整理。
Lefevre 等用微流控粘度计测 150 mg/mL，Paidi 等用锥板流变仪测约 180 mg/mL。Kalejaye 等用 Honeybun 测 150 mg/mL：默认 35 µL 模式，22 °C，三次重复，每轮同时测 10 cP 标准品。
Honeybun 的操作和数据见《170 mg/mL 单抗需升温至多少度，粘度才降至 20 cP 以下？》和《高浓度蛋白测粘度：10 个样品并行》。稳定性与粘度同时筛选的案例见《一轮配方筛选，同时比较稳定性与粘度》。
Wang 2025：15 个单抗在 1–10 mg/mL 下用 Stunner 测 kD，研究终点是界面应力产生的亚可见颗粒。作者报告，kD 与搅拌产生的亚可见颗粒没有相关性。与颗粒相关的是固液界面吸附速率常数 λ，高密度聚乙烯容器中 rs = 0.70，硼硅玻璃中 rs = 0.60。
Hong 2025：帕博利珠单抗（IgG4）和地舒单抗（IgG2）用 Stunner 的 B22 和 kD 应用测定。浓度为 1、2、5、10 mg/mL，每孔 2 µL、三复孔。低 pH 下两者 kD 都明显为正。pH 5.5 时帕博利珠单抗为负，地舒单抗略为正。加入 10% w/v 甘露醇、山梨醇、海藻糖或蔗糖后，低 pH 下的 kD 进一步升高。
Fischer 2024：Stunner 用于测定单抗浓缩后的蛋白浓度。研究主题是高通量氧化筛选，不涉及 kD。