抗体寡核苷酸偶联物（antibody-oligo conjugate，AOC）含蛋白和核酸两种组分，定量和药物抗体比（DAR）分析都要同时兼顾两者。两者的吸收峰都落在 240–280 nm 区间，简单的双波长分析易受噪声影响，并需要大量消光系数信息。蛋白和核酸分开检测则耗时，也更费样品。本文用两个模拟 AOC 样品展示 Stunner 的光谱解混：一次测量报告抗体浓度、寡核苷酸浓度和 DAR，并用 DLS 检查聚集。
Stunner 的 ADC Quant 应用调用存储的各组分全光谱数据，由 Unmix 算法把实测吸收光谱解卷积为各个组分（Figure 1）。抗体、寡核苷酸和 DAR 都由 2 µL 样品得出。加上 DLS 后，每个样品的测量在 1 分钟内完成，样品板为 96 孔板。
同样的光谱解混用于 ADC 的情况，见《Stunner 十分钟左右测定 96 个样品的 DAR》和《有没有消光系数和参考光谱，Stunner 都有对应的 ADC 测法》。
Figure 1. 抗体（灰）与寡核苷酸（蓝）的吸收光谱相加，得到 AOC 总光谱（绿）。
人 IgG 与西兰花 RNA 适配体（broccoli RNA aptamer）按两种比例混合，得到 DAR 不同的两个模拟 AOC 样品。两个样品都在 Stunner 上用 ADC + Sizing 应用测定，各做四次重复。解混使用默认光谱。
Stunner 从 AOC 总吸收光谱中分离并定量抗体、寡核苷酸和噪声三个组分。低 DAR 样品的寡核苷酸峰相对抗体峰较低（Figure 2A），高 DAR 样品相对较高（Figure 2B）。
Figure 2A. 低 DAR 模拟 AOC（Sample 1）。黑：AOC 总吸收；蓝：抗体；绿：寡核苷酸；黄：噪声。
Figure 2B. 高 DAR 模拟 AOC（Sample 2）。线色含义同 Figure 2A。
Stunner 自动报告每个样品的抗体浓度、寡核苷酸（载荷）浓度和 DAR（Table 1）。每个样品的四次重复光谱也相互重叠（Figure 3）。
指标 / Sample 1（低 DAR） / Sample 2（高 DAR）
抗体浓度（mg/mL）:Sample 1（低 DAR） 7.235 ± 0.011（CV 0.15%）;Sample 2（高 DAR） 3.602 ± 0.022（CV 0.60%）
载荷浓度（µg/mL）:Sample 1（低 DAR） 933.2 ± 11.9（CV 1.27%）;Sample 2（高 DAR） 1028.2 ± 8.1（CV 0.79%）
DAR（mol/mol）:Sample 1（低 DAR） 1.200;Sample 2（高 DAR） 2.725
Table 1. 两个模拟 AOC 的 UV/Vis 定量结果，n = 4，均值 ± SD。
Figure 3. 全部 8 次测量的吸收光谱叠加，Sample 1 与 Sample 2 各 4 次。
每次 AOC 测量都同时给出 DLS 的水合直径和多分散指数（PdI），不需要额外测量。全部 8 次测量的质量分布紧密重叠，均为单峰（Figure 4），表明样品单分散、未见聚集（Table 2）。
Figure 4. 全部 8 次测量的 DLS 质量分布叠加，Sample 1 与 Sample 2 各 4 次。
指标 / Sample 1 / Sample 2
Z 均直径（nm）:Sample 1 13.68 ± 0.11（CV 0.80%）;Sample 2 13.75 ± 0.15（CV 1.09%）
PdI:Sample 1 0.117 ± 0.008;Sample 2 0.115 ± 0.009
Table 2. 两个模拟 AOC 的 DLS 结果，n = 4，均值 ± SD。