【Webinar】一次换 96 个样品，中途不用守着：Lil' Tuna 台式全自动换液

关于本次 Webinar

蛋白制剂开发、病毒载体浓缩、核酸脱盐，第一步都是换液。透析太慢，离心有膜堵和聚集风险，TFF 更适合大体积且搭建复杂；样品数一上去，换液就成了整条线的瓶颈。

Lil' Tuna 是全自动的板式台式换液系统，蛋白、核酸、病毒载体都能做。Unfilter 96 或 Unfilter 24 板一次跑 96 个或 24 个，少量样品用 Una，回收率 ≥96%。压力式 UF/DF 逐孔测体积、按实测流速自动补缓冲液，一轮轮跑到目标置换率，中间不需要人值守；想先取走跑完的样品，也可以中途暂停。

Brian Haldeman 在这场里演示了实验设置：满板 96 个和只跑几个，设置界面相同；换液带浓缩、还是只浓缩，都能配置。最后一段讲它怎么接进自动化：通用 API、机械手够得着的板位、模板表直接导入。后半场是现场问答，从粘度上限、膜的重复使用、管路维护，一直问到和 Unagi / Big Tuna 的关系。

### 你将了解到

• 00:00:00 · 00:01:09 · 开场：主持人与主讲人介绍 · Andre（产品管理）主持，介绍主讲 Brian Haldeman——Unchained Labs 换液线产品经理，今天讲新上市的 Lil' Tuna。
• 00:01:09 · 00:01:50 · 开场比喻：换液就是实验室里的堵车 · Brian 用湾区高速堵车起头：路上开得好好的，一拐弯全停了。换液在实验室里就是这个瓶颈，他想介绍的是那条快速通道。
• 00:01:50 · 00:02:48 · 为什么传统方法跟不上 · 蛋白制剂开发、病毒载体浓缩、核酸脱盐都要先换液；样品一多，透析太慢、离心有膜堵和聚集风险、TFF 更适合大体积且搭建复杂。
• 00:02:48 · 00:03:16 · Lil' Tuna 是什么 · 全自动、板式、台式的换液与浓缩平台，一次最多跑 96 个置换。
• 00:03:16 · 00:04:10 · 三种耗材形态，按通量选 · Unfilter 96、Unfilter 24、Una 三种耗材底部都是半透膜，三种耗材共用一台仪器，满板和少量样品都能跑。膜有两种化学材质、多档截留分子量。
• 00:04:10 · 00:05:43 · 压力式 UF/DF：逐孔测体积 + 可调压力 · 超声传感器逐孔量出真实体积，15–60 psi 之间任选压力，按分子特性调。
• 00:05:43 · 00:06:27 · 轨道混匀：避开死端过滤 · 加压时的轨道混匀让样品保持均匀，不在膜面堆积。离心式超滤的死端过滤会把样品压向膜，这里绕开了这个问题，置换更一致也更高效。
• 00:06:27 · 00:07:49 · 实测：回收率与粒径 · Unfilter 96 跑 96 复孔 10 mg/mL BSA、Unfilter 24 跑 10 mg/mL IgG，都达到 96% 目标置换率和 ≥96% 回收率；用 Stunner 的 DLS 测置换前后粒径，没有明显变化。
• 00:07:49 · 00:08:50 · 泵驱动分液：6 个条件同时下 · 分液从移液枪换成蠕动泵，最多 6 种条件并行。分液量程 25 µL 到 8 mL，从水到 50% 甘油的粘度范围内都准，各体积点 CV 都 <1%。
• 00:08:50 · 00:09:49 · 大体积减容：1 L 到 192 mL · 刚纯化出来的 AAV 往往很稀。把稀样品当成缓冲液装进瓶子、反复往孔里补，就能浓缩到一块 Unfilter 24 的 192 mL，还能再往下浓。
• 00:09:49 · 00:10:40 · 高粘度样品：把步骤倒过来 · 做可注射性和成药性测试要把样品浓上去。样品本来就稠时，先分液后加压——先稀释再置换，样品不会变得太粘。
• 00:10:40 · 00:11:51 · 软件：几个界面就能开始运行 · 和 Stunner / Lunatic 软件一脉相承。选实验类型、扫条码自动带出信息、在板图上用数字标样品、颜色标缓冲液；高通量场景可以用模板表直接导入。
• 00:11:51 · 00:12:49 · 运行中：进度屏 + 暂停取样 · 进度屏专门做成隔着房间也看得清：当前循环、剩余时间，绿色表示到了目标置换率、蓝色还没到。有样品跑得快，可以中途暂停把完成的取走，剩下的接着跑。
• 00:12:49 · 00:14:22 · 接进自动化：硬件、API 与整条工作流 · 板位特意做成机械手够得到；软件给的是通用 API，能和实验室其它机器人对话。可以直接接进 Stuntman，也能和同为 96 孔板进样的 Stunner、Aunty 串起来，样品全程不换板。
• 00:14:22 · 00:15:33 · 小结：换液之后接着测 · 换完液测浓度用 Lunatic，要同时看粒径用 Stunner，要跑温度梯度看稳定性用 Aunty。Brian 收在他的比喻上：换液这段路，前面是空的。
• 00:15:33 · 00:16:18 · 问答开始 · Andre 回顾要点，提到自己做博后时在离心机前耗掉的时间；现场提问很踊跃，开始逐条过。
• 00:16:18 · 00:17:08 · Q：与 Unagi、Big Tuna 有何不同？ · 留下的是耗材和压力式 UF/DF 的路子；变的是一台机器兼容全部三种耗材、泵驱动分液更快、台式体积能进自动化工作流，机械手也够得着。
• 00:17:08 · 00:18:30 · Q：浓缩能做到多小体积？怎么控？ · Unfilter 96 是 100–450 µL，Unfilter 24 是 450 µL–8 mL。靠算法在每个加压步骤算流速、动态调加压时长，保证不低于下限。
• 00:18:30 · 00:19:11 · Q：它在哪些方面适配自动化？ · 硬件上板位对机械手开放；软件上有通用 API 能和任何机器人系统对话，高通量场景还能用样品模板表批量导入，不用一个个在软件里点。
• 00:19:11 · 00:20:22 · Q：对振荡和剪切敏感、易聚集的蛋白能做吗？ · 偶联物这类比普通抗体更易聚集的样品他们做过。压力 psi、混匀转速、占空比都能按样品调。相比离心式一直把样品压向膜，可调参数更多，置换也更温和。
• 00:20:22 · 00:21:04 · Q：回收率和粒径是怎么定义的？ · 回收率 = 取出的体积 × UV-Vis 测的浓度，和投入量比；实验里用的是 Stunner，顺带给出粒径，粒径作为置换后的样品质量把关。
• 00:21:04 · 00:22:14 · Q：同一批样品流速不一样怎么办？ · 做配方筛选时必然会遇到。每个加压步骤测完体积就算出流速、跟踪它的变化，实时调整加压时长，保证样品不跑干；结束时快的可以先取走。
• 00:22:14 · 00:22:58 · Q：上机前要不要把浓度归一？ · 建议浓度接近，这样流速最好预测，但不是硬要求。Andre 补充：决定流速的终究是各样品的粘度，浓度只是影响粘度的参数之一。
• 00:22:58 · 00:23:56 · Q：膜材质和截留分子量有哪些？会扩吗？ · 两种膜：再生纤维素和 PES。截留分子量方面 Unfilter 96 有 3 kDa，10/30/100 kDa 则 Unfilter 和 Una 都有。想要别的规格可以提，需求集中他们就能做。
• 00:23:56 · 00:24:12 · Q：体积是逐孔测的吗？ · 是逐孔测，而且每个加压步骤后都测一次，所以每个样品的流速都是实时的。
• 00:24:12 · 00:25:02 · Q：粘度上限是多少？ · 他们习惯换算成蛋白浓度看：常规单抗建议上限 200 mg/mL，大致对应 50 cP 上下（具体随样品和配方缓冲液变）。这不是仪器的限制，是换液要花多久的限制。
• 00:25:02 · 00:25:47 · Q：日常维护包括哪些？管路需要清洗吗？ · 泵驱动分液带来的好处是跑完能冲管路：建议用 20% 乙醇吹扫每条管路，避免缓冲盐积存。管路时间长了要换，软件会一条条带着做，客户自己就能换。
• 00:25:47 · 00:26:08 · Q：什么样品能上？ · 蛋白和抗体、核酸、病毒载体，这三类是主要推荐范围。
• 00:26:08 · 00:27:24 · Q：所有样品起始体积必须一样吗？ · 不必。可以让仪器在置换前先把体积归一；也可以直接用体积传感器读出每个孔的实际体积，按各自情况定置换条件。起始体积差异较大时也能处理。
• 00:27:24 · 00:28:02 · Q：开放式板子如何防尘？ · 整个置换过程里样品暴露在空气中的时间很短，大部分时间在加压腔里受保护。真的很在意灰尘，机器体积小，可以整台放进通风橱。
• 00:28:02 · 00:29:14 · Q：1 L 到 192 mL 具体怎么跑？ · 把大体积稀样品装进缓冲液瓶，当成缓冲液往孔里分，加压浓缩、再补料、再浓缩。Unfilter 24 是 8 mL × 24 = 192 mL，到这一步还想更浓可以再加一步。
• 00:29:14 · 00:29:53 · Q：单个样品超过 8 mL 怎么办？ · 可以拆到多个孔——48 mL 就用 Unfilter 24 的 6 个孔，或者用 Una；也可以走前面那套大体积减容的路子。
• 00:29:53 · 00:30:27 · Q：上样前要先润湿膜吗？ · 建议先润湿，用样品当下所在的那个缓冲液润，再加样品，不要直接上干膜。
• 00:30:27 · 00:31:05 · Q：同样条件下比 Big Tuna 快还是慢？ · 更快。差别在分液：不用吸头一次 1 mL 地往每个孔里挪，六个泵能同时下六种缓冲液，每个加压步骤后的分液时间大幅压缩。
• 00:31:05 · 00:31:21 · Q：体积测量和 Big Tuna 是同一套原理吗？ · 原理相同，都是超声体积传感器，但用的是完全不同的传感器。
• 00:31:21 · 00:31:56 · Q：96 孔板能只用一部分，剩下的孔留着吗？ · 可以跑半板。建议一块板最多分两次置换用——这次用半块，另外半块下次再用。
• 00:31:56 · 00:32:25 · Q：一次能用几种缓冲液？ · 六个泵，所以一次最多六种缓冲液；做配方筛选就是六种配方条件同时跑。
• 00:32:25 · 00:32:58 · Q：「把跑完的取出来」是要一个个吸吗？ · 暂停后仪器会把板递出来，机械手取或者手动取都行；取走完成的样品，把板放回去，没到目标的接着跑。
• 00:32:58 · 00:33:14 · Q：与 Unagi 相比体积多大？ · 比 Unagi 小，占地面积和 Stunner 差不多。
• 00:33:14 · 00:34:22 · Q：缓冲液有什么限制？ · 生物药常规缓冲液都兼容，50% 甘油这种粘的也能准确分液。要当心的是高浓度有机溶剂和高浓度去污剂——后者容易起泡、影响体积测量，不过降低振荡等办法能缓解。
• 00:34:22 · 00:34:41 · Q：老机型有以旧换新吗？ · 有以旧换新方案，具体细节找当地客户经理谈。
• 00:34:41 · 00:35:19 · Q：能安排演示吗？ · 官方口径：demo 机 Q4 到位；现在就想看的，可以先用在售的换液机型做概念验证。
• 00:35:19 · 00:35:45 · Q：一块 Unfilter 板上能同时换几种缓冲液？ · 泵驱动分液、六个泵，单次运行最多六种缓冲液条件或六种配方。
• 00:35:45 · 00:36:47 · Q：膜能重复用吗？收尾 · 膜不能重复用，每个孔一次性。但半块板的另一半可以留到下次跑。Andre 致谢收场。
• 看压力式 UF/DF 怎么把缓冲液置换和样品浓缩这两件事自动化
• 弄清 Lil’ Tuna 用 SBS 板一次跑 1–96 个样品是怎么做到的，人要动手的部分剩多少
• 了解它怎么接进自动化工作流，把高通量生物药表征的前处理这一段提速