上一篇认识了 Aunty 板的结构。本篇讲上机前的三步:加样、封板、把板放上样品台,最后说明实验结束后怎样取板。按下面的方法操作,每孔样品量一致、封膜贴严。
Aunty 板的每个孔都有两个开口:进样口(inlet)用来加样,排气孔(vent hole)让孔内空气排出。进样口按 SBS 96 孔板的标准间距排列:每行 12 个(1–12),每列 8 个(A–H)。
因此,单道移液器、8 道或 12 道多道移液器,以及自动化液体工作站,都能直接对准进样口加样。接入工作站的做法见《怎样把 Aunty 接入自动化工作站?》。
每孔加 8 µL 样品。按以下方法操作:
8 道移液器一次加满一列(A–H)。进样口间距与标准 96 孔板相同。
加样量就是 8 µL:
- · 枪头不下压,孔口保持通畅,样品才能顺利流入。
- · 加够 8 µL,孔内不留气泡。
- · 不超过 8 µL,孔口保持干净,封膜才能贴严。
封膜(seal)是一张惰性贴膜,带有拉片(tab),供手拿和对位。封膜按以下步骤:
封膜贴在一条芯片(chip)上。封膜伸出板外的部分是拉片,贴好后撕掉。
封膜上有打孔线。撕背衬之前,先沿打孔线把封膜分开,按要封的芯片条数取用。然后撕背衬、对齐、按压,方法同上。
封膜可以揭下。例如一条芯片上次只用了一部分,可以揭下封膜,在空孔里补加样品,再贴一张新封膜后上机。每张封膜只贴一次。
放板之前,逐项确认:
Aunty 板在 A1 孔旁有一个缺口(notch)。样品台上的板座(plate nest)有对应的形状,只能按一个方向放进去。
Aunty 板俯视图。左侧印有行号 A–H,A1 孔在左上角,缺口在 A1 旁的板角。
舱门和样品台会自动移动:开合过程中,手远离舱门和样品台。