认识 Aunty：仪器、Aunty 板和两套软件

这套指南共 5 篇，带你从认识仪器走到独立跑完一块板、读懂结果。本篇先认识 Aunty 的硬件、耗材和软件，后面每一篇都会用到这里的名称。

安装场地的准备见《Aunty 安装前的实验室准备》，电脑配置见《Aunty 电脑配置与防火墙设置》。

一次热升温，同时读出构象和聚集

Aunty 是一台台式蛋白稳定性分析仪。它把全光谱荧光、静态光散射（SLS）和动态光散射（DLS）装在同一台仪器里。一块板放 96 个样品，每孔 8 µL。升温过程中，Aunty 每分钟读完整块板。

选含粒径测定的子类型时，一次热升温（thermal ramp）可同时得到下面四个温度：

参数 / 检测 / 含义

Tm:检测 荧光;含义 熔解温度（melting temperature）：蛋白去折叠进行到一半时的温度

Tonset:检测 荧光;含义 去折叠起始温度

Tagg:检测 SLS;含义 聚集起始温度

Tsize:检测 DLS;含义 粒径开始增大的温度

除了热升温，Aunty 还做胶体稳定性、等温稳定性和病毒载体稳定性，也可以单独做 DLS 粒径测定。胶体稳定性读数包括扩散相互作用参数 kD、第二维里系数 B22 和 Kirkwood-Buff 积分 G22。每个参数的物理含义见《Aunty 测的每个参数是什么意思？》。

一台主机、一台电脑、三根线

Aunty 系统由以下部分组成：

主机正面有一扇电动舱门。加样后的 Aunty 板经这扇门送入仪器。

Aunty 主机正面。中部偏右的矩形窗口是电动舱门。

主机背面只有电源开关、电源插座和 USB 接口。USB 线把仪器连到电脑，Aunty Client 通过它控制仪器。

Aunty 主机背面。右下角是电源开关和下方的电源插座，左侧是 USB 接口。

样品台控温和移位，两套光学同时读数

仪器内部有三个关键部件：

样品台（stage）

样品台承载 Aunty 板，测量时把各孔依次移到光学系统下方，同时控制样品温度。控温范围 15–95 °C，准确度 ±0.1 °C，升温速率 0.1–10 °C/min。

荧光系统

两只 LED 作激发光源：280 nm 紫外 LED 激发蛋白内源荧光，470 nm 蓝光 LED 激发报告染料。光谱仪记录 250–750 nm 的完整发射光谱，用于计算 Tm 和 Tonset。

光散射系统

660 nm 红光激光作光源，雪崩光电二极管作检测器。SLS 和 DLS 共用这套光路：SLS 给出 Tagg，DLS 给出粒径、粒径分布和 Tsize。

荧光和光散射可以单独运行，也可以在同一次实验里一起运行。去折叠和聚集在同一次升温、同一个孔里读出，哪一个先发生可以直接对照。

96 孔石英板，一分钟内加完

Aunty 板是 Aunty 的专用样品板，也是首款用于稳定性表征的 96 孔石英玻璃耗材。石英孔光学性能好，与绝大多数样品化学兼容。

一块板加样不到一分钟。加样、封板和上机的具体做法在第 2 篇。板和封膜的货号见 Aunty 耗材清单。

Client 负责采集，Analysis 负责分析

Aunty 配两套软件，随仪器提供：

软件 / 做什么 / 详见

Aunty Client:做什么 控制仪器：选应用、选孔、设温度程序和采集参数，启动实验并实时显示数据;详见 第 3 篇

Aunty Analysis:做什么 打开实验文件，从整板概览到单孔曲线、完整光谱逐层查看，可多个实验叠加比较;详见 第 4 篇

软件升级步骤见《Aunty 软件更新：先卸旧版，再装新版》。

先记住这几个词

软件界面保留英文名称，本系列首次出现时给出中文。

术语:含义

孔（Well）:测试时盛放样品的石英腔；一块 Aunty 板有 96 个孔

样品（Sample）:加进孔里待测的液体制剂

样品台（Stage）:承载 Aunty 板，测量时移动板并控制样品温度

方法（Method）:一套测量方案，包含温度程序、数据采集方式和设备设置

设备设置（Device Settings）:激发光源、光强和曝光时间的组合

光谱（Spectrum）:280 nm 或 470 nm 激发后，250–750 nm 范围内的荧光发射强度

BCM:重心波长（barycentric mean），即整条荧光光谱的加权平均波长。蛋白去折叠时 BCM 会移动，常用来计算 Tm

技术规格

每孔样品量:8 µL

每次实验样品数:96

读完一块 96 孔板:1 min

温度范围:15–95 °C

升温速率:0.1–10 °C/min

温度准确度:±0.1 °C

荧光激发:280 nm 紫外 LED、470 nm 蓝光 LED

荧光检测:光谱仪，250–750 nm 全光谱

荧光兼容:蛋白内源荧光；报告染料（DSF 染料、核酸染料、膜蛋白染料）

Tm 精度:<1% CV

蛋白浓度（荧光）:0.025–300 mg/mL IgG（随蛋白而定）

AAV 基因组浓度:≥5 × 10¹¹ vg/mL

光散射激发:660 nm 红光激光

光散射检测:雪崩光电二极管

SLS 浓度:0.05–300 mg/mL IgG（随蛋白而定）

SLS 分辨率:平均分子量变化 ≥15 kDa

DLS 粒径范围:0.3–1000 nm

DLS 粒径准确度:±2%

DLS 最低浓度:≥0.1 mg/mL 溶菌酶

分子量范围:192 Da–25 MDa

外形尺寸与重量:43 cm 宽 × 59 cm 深 × 39 cm 高；32 kg

激光等级:1 类激光产品