Unchained Labs 有问必答

mRNA 是什么？从中心法则到 mRNA 药物

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

中心法则、mRNA 的药物逻辑、RNA 家族（siRNA/ASO/saRNA）、核苷修饰的突破（假尿嘧啶核苷）、60 年发展简史、以及 mRNA 在疫苗/癌症/基因编辑中的应用全景。LNP 从零开始系列第 1 篇。

mRNA 这么脆弱，怎么送进细胞？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

裸 mRNA 为什么进不了细胞（降解/电荷/免疫/分子量四重困境）、三类载体对比（病毒/聚合物/LNP）、可电离脂质的四代演化、LNP 四组分结构、自组装包封机制、以及从注射到翻译的体内旅程。LNP 从零开始系列第 2 篇。

LNP 的四种成分，缺一不可

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

可电离脂质的 pH 响应机制与三代演化、DSPC vs DOPE 的结构差异与功能取舍、胆固醇如何影响器官靶向、PEG 困境与抗 PEG 抗体问题、四种组分的配比平衡逻辑。LNP 从零开始系列第 3 篇。

LNP 进了身体之后发生了什么？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

蛋白冠与肝靶向（ApoE/LDLR）、三条内吞路径（网格蛋白/小窝蛋白/巨胞饮）、内体逃逸瓶颈（pH 依赖膜融合，仅 1-2% 成功）、mRNA 翻译机制（eIF4E/PABP/环化）、脂质降解与体内清除。LNP 从零开始系列第 4 篇。

LNP 怎么做出来？从手工到微流控

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

薄膜水化法/乙醇注射法/高压均质等传统方法的优劣、微流控混合为什么成为现代标准（T 型/人字形/射流混合器）、FRR/TFR/N:P 等关键工艺参数、TFF 缓冲液交换与无菌过滤、从实验室到工厂的放大策略。LNP 从零开始系列第 5 篇。

做出来的 LNP 好不好？关键质量指标

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

粒径与 PDI（DLS 原理与鱼塘类比）、包封效率（Ribogreen 信封类比）、mRNA 完整性（凝胶电泳/毛细管电泳）、Zeta 电位（表面电荷与安全性）、Cryo-TEM 形态学、CQA 综合判断标准。LNP 从零开始系列第 6 篇。

打在哪里有讲究——五条给药路径

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

肌注（疫苗主力）、静脉注射（天然趋肝 + SORT 器官靶向技术）、鼻腔给药（黏膜 IgA 免疫）、口服（胃肠道极限挑战）、透皮（微针突破角质层）——五条路径的生物学逻辑、屏障和设计策略。LNP 从零开始系列第 7 篇。

mRNA 疫苗：COVID 疫苗的设计细节与下一批管线

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

COVID-19 疫苗从序列公布到紧急使用授权的时间线、BNT162b2 与 mRNA-1273 的设计对比（S-2P 突变/密码子优化/LNP 配方）、核苷修饰 m1Ψ 的 44 倍表达提升、三种 mRNA 架构（nrRNA/saRNA/circRNA）、以及流感/寨卡/HIV/疟疾等下一代管线。LNP 从零开始系列第 8 篇。

不只是疫苗：基因编辑与癌症免疫治疗

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

个性化新抗原疫苗（mRNA-4157 + pembrolizumab，KEYNOTE-942）、肿瘤微环境重塑（IL-12/IFN-γ/p53）、体内 CAR-T/CAR-M 编程（绕开体外制备）、CRISPR/Cas9 mRNA 递送（NTLA-2001）、蛋白替代疗法、以及为什么这些场景比疫苗难一个量级。LNP 从零开始系列第 9 篇。

LNP 的安全性：我们该担心什么？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

mRNA 先天免疫激活（TLR3/7/8、RIG-I、dsRNA 杂质）、LNP 内体损伤与 NLRP3 炎性体、PEG 过敏/CARPA/ABC 加速清除、肝毒性（可电离脂质代谢产物）与心肌炎（年轻男性第二剂后）、基因组整合不存在的生物学证据、以及七大改良策略。LNP 从零开始系列第 10 篇。

LNP-mRNA 的下一个十年

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

SORT 器官靶向技术（DOTAP 肝→肺切换、阴离子脂质→脾）、脂质结构调控（支链酯键/pKa 6.2-6.5 适配肿瘤）、配体介导主动靶向（GalNAc/folate/mannose）、AI/ML 驱动的脂质设计与高通量筛选、冻干突破冷链、规模化生产瓶颈（成本 10-100×）、个性化治疗、监管协调与全球可及性。LNP 从零开始系列第 11 篇（完结）。

为什么定量绕不开紫外

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法科普系列导论。从实验室三场景(OD600 菌液、NanoDrop 质粒、抗体 A280)切入,用八大定量场景全景表覆盖紫外可见光谱(200–800 nm)的应用边界,讲清这个 160 年历史方法为什么至今没被替代:快、便宜、样品量小。同时不回避它的四条盲点——灵敏度有限、选择性差、易受干扰、高浓度偏离线性。紫外分光光度法系列第 0 篇(导论)。

光是什么:从牛顿棱镜到紫外可见光谱

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 1 篇。从牛顿 1666 年暗室三棱镜分光讲起,把整道电磁波谱走完:人眼可见 400–700 nm、紫外分三段(UVA/UVB/UVC)、真空紫外为什么要避开。200 nm 是空气氧气吸收的极限,800 nm 是水的 O–H 振动泛音和硅基检测器响应的共同边界。光子能量 E = 1240/λ,4.43 eV 的 280 nm 光子刚好匹配芳香氨基酸的 π-π* 跃迁——不是生物巧合,是物理巧合。

Beer-Lambert 定律漏掉的人:Bouguer

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 2 篇。把这条看似简单的 A = εcb 拆开:1729 Bouguer 给路径、1760 Lambert 数学化、1852 Beer 加浓度(但原文理论框架在折射率)、1913 Luther 才定型现代对数形式。四个字母各是什么物理量:A 无量纲对数、ε 分子固有属性(Trp 5500、Tyr 1490、二硫键 125 可加)、c 摩尔或质量浓度、b 光程(Lunatic 短到 0.1 mm)。Planck 1903 已从理论上证明它只是稀溶液近似——三类偏离:高浓度分子互作、杂散光、化学平衡位移。工作区 A = 0.1–1.5

仪器内部:光从灯泡到检测器的旅程

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 3 篇。把紫外仪拆开看,四件事串成一条光路:光源、分光、样品池、检测器。光源三种方案(氘+钨两灯接力、氙灯单灯闪光、LED 阵列),Lunatic / Stunner 用的是氙灯。单色器用光栅衍射挑波长,光谱带宽 1–2 nm 够常规蛋白核酸定量。样品池三种主流构型:比色皿 10 mm、液滴柱 1 mm、微流控板 0.1 / 0.5 / 0.7 mm,本质都是让光以固定光程穿过溶液。检测器 PMT 扫描式 vs PDA 阵列式——PDA 一次闪光拿全谱。所有 A 值最终追溯到三部药典的三项核心校准:波长(Ho₂O₃ / K₂Cr₂O

测蛋白浓度:A280、BCA、Bradford、Lowry 怎么选

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 4 篇。实验室常见四种蛋白浓度测定法的根基和选择。A280 的物理根基(Trp 吲哚 + Tyr 苯酚 + Cys-Cys 二硫键三个发色基团);ε 公式定型的 28 年(Edelhoch 1967 模型化合物 → Mach 1992 32 蛋白回归 + 330 nm 散射校正 → Pace 1995 80 蛋白,ε = 5500·n(Trp) + 1490·n(Tyr) + 125·n(cystine),ExPASy 用的那条)。A280 三个盲点:无 Trp/Tyr 蛋白(胶原明胶)、核酸干扰(Warburg-Christian

A260 测核酸:那个 1.8/2.0 经验值靠谱吗

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 5 篇。A260 测核酸背后的物理根基和最大的坑。四碱基峰位和 ε 差异(A 256.7/15.4,C 265.7/7.4,G 247.3/11.5,T 265.1/8.7 — Tataurov 2008),嘌呤 ε 约是嘧啶两倍。通用转换因子 50/33/40 的两层物理:平均碱基组成 + 双链减色效应(h(260) = 0.287·f_AT + 0.059·f_GC,AT 减色 29% vs GC 5.9%)。A260/A280 的 1.8/2.0 是经验值不是定律 — Wilfinger 1997 震撼实验:同一管 RNA 仅

A280 读高了?可能是散射在干扰

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 6 篇。蛋白样品浑浊时 A280 偏高,不是吸收变强而是散射被误读成吸收。瑞利散射 λ⁻⁴ 规律:280 nm 散射强度是 560 nm 的 16 倍、330 nm 的约 2 倍。A330 是散射指示灯。三种处理方法:Pace 1995 的 330 nm 校正公式 A₂₈₀(真) = A₂₈₀(测) − 1.929 × A₃₃₀,1.929 = (330/280)⁴;Mach 1992 在 32 个蛋白上测:多数蛋白散射 <2%,血清白蛋白 ~3%,α-晶状体 5–7%;β-乳球蛋白校正 5%。Savitzky-Golay 1964

吸光度的两个延伸:酶动力学读速率,OD600 读散射

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 7 篇。前 5 篇讲紫外定量,本篇讲紫外能做的另外两件事:测酶活(读 dA/dt)和测菌密度(读 OD600 散射)。酶动力学靠 Horecker 1948 在 JBC 上发的短文:用三种独立脱氢酶反应交叉测定 NADH 在 340 nm 的摩尔消光系数 ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹,NAD+ 在 340 nm 贴底 + NADH 有峰构成干净差分信号。OD600 源自 Koch 1970 Analytical Biochem 的仪器对比:E. coli strain B 葡萄糖 M9 指数生长期,细菌尺寸 1 μm + 光波长

同一管 RNA 读数差 16%:比色皿、缓冲液和 pH 的影响

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 8 篇。紫外定量的精度,一半在 Beer-Lambert 公式,一半在样品怎么装进仪器。本篇按 Agilent primer 和 Wilfinger 1997 把样品处理的四类陷阱讲透:(1) 比色皿材料 UV 截止(熔融石英 190 nm/普通石英 210 nm/玻璃 320 nm/塑料 300 nm);光程公差 ±0.01 mm,反射损失 ~10%。(2) 常见溶剂 UV 截止(水 <195, 甲醇 210, 氯仿 246, DMSO 270, 丙酮 331);Tris 缓冲液在 UV 区有自吸收,TNE 缓冲液让 A260 比

中国药典 2025 版对紫外仪的要求，以及按它放行要准备什么

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

紫外分光光度法系列第 9 篇(压轴篇,面向药企 QA/QC/法规/生产)。中国药典 2025 年版对紫外仪这条线动了两处:新增指导原则 9094《分析仪器确证》—— 中国药典第一次有了自己的 DQ/IQ/OQ/PQ 四阶段框架;9101 分析方法验证把原八项验证清单重构成四个性能特征。本篇摊开 2025 版的三层落点(测量性能 0401 / 仪器确证 9094 / 方法验证 9101),外加一条常被跳过的:用紫外法测蛋白浓度的法定方法不在 0401,在通则 0731《蛋白质含量测定法》第六法。0401 实况:适用 190~800nm;校正与检定只列三项

【Webinar】蛋白和 ADC 配方筛选：8 µL 测热稳定和聚集

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

Unchained Labs 的 Ross Walton 讲配方筛选:蛋白、单抗和 ADC 的稳定性,为什么要同时看构象(去折叠)和胶体(聚集)两条线。Aunty 用 8 µL 样品、在 96 孔 SBS 石英板上一次实验同时跑全光谱 DSF、SLS 和 DLS,把熔解和聚集数据一次拿齐。两个案例:三个抗体加一个酶的 DoE 辅料筛选,以及共用抗体骨架、payload 不同的几个 ADC 对比。含中英双语字幕、章节导航和完整 Q&A。

读懂光散射结果:Z-ave、PDI、B₂₂、Tagg 各从哪段信号来

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

从零开始讲光散射。不预设你学过 DLS 或 SLS，用四个实验室常见问题（多大？纯不纯？会不会扎堆？什么温度出事？）串起全部知识点。涵盖 SLS 三大功能（分子量、B₂₂、Tagg）、DLS 全链路（布朗运动→ACF→Stokes-Einstein→粒径）、Z 均粒径 vs 多峰分布、d⁶ 陷阱、检测角度选择（RADLS）、胶体稳定性评估（B₂₂/kD/G₂₂）。读完后你能看懂自己的光散射数据。

内源荧光不够用时，用全光谱荧光加染料测热稳定性

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

没有色氨酸的蛋白、膜蛋白、需要染料辅助的蛋白——Aunty 250–750 nm 全光谱荧光同时采集内源荧光和染料信号，配合 SLS/DLS 一次实验拿到 Tm、Tagg 和粒径。三个案例：SYPRO Orange × IgG、ANS × RNase A、CPM × BLG。

一轮配方筛选，同时比较稳定性与粘度

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

用 Uncle/Aunty 测 Tm、Tagg 和 DLS 粒径，用 Honeybun 测粘度——对多种抗体在 4 种辅料配方中、3 个浓度下进行配方筛选，找出最佳辅料组合。

96 个样品同时升温，去折叠和聚集一次读出

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

全光谱荧光、SLS 和 DLS 在石英 96 孔板上每分钟读取全部样品。用实际数据验证 Aunty 的重复性和配方筛选能力，展示精氨酸对去折叠和聚集的双重影响。

怎样把 Aunty 接入自动化工作站？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

SBS 标准石英板可由液体处理系统加载，密封可手动或自动完成，实验通过 API 远程控制。本文列出 Aunty 的自动化集成选项和物理安装要求。

Aunty 测的每个参数是什么意思？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

Aunty 将 DSF、DLS 和 SLS 整合在一次实验中，测定蛋白的熔解、聚集和粒径。本文解释 Tm、Tagg、Tsize、PDI、B22、kD 等每个输出参数的物理含义。

Aunty 能做什么？构象、聚集、粒径、胶体和衣壳稳定性实测

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

全光谱荧光、SLS、DLS 和精密温控，在同一块 96 孔石英板上协同工作。用蛋白和病毒载体的实际数据，展示 Aunty 在热升温、粒径测定、胶体稳定性和等温稳定性方面的表现。

ADC 比母体 mAb 更不稳定吗？Aunty 同步测构象和胶体稳定性

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

Herceptin、Kanjinti、Kadcyla、Enhertu——两种 mAb 加两种 ADC，用 Aunty 同步测定 kD、B22、Tm、Tagg 和 DLS 粒径，比较构象和胶体稳定性差异。

Aunty 安装前，实验室要备好什么

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

安装由 Unchained Labs 工程师或应用科学家到场完成。安装前需确认实验室条件：系统组件、尺寸重量、空间间隙、环境要求、电气要求及安装前检查清单。

Aunty 软件更新：先卸旧版，再装新版

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

更新 Aunty 软件需要先卸载旧版本再安装新版本，Aunty Client 和 Aunty Analysis 两个组件需分别操作。

Aunty 电脑配置与防火墙设置

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

每台 Aunty 附带一台预配置电脑，确保仪器通信稳定。本文介绍配套电脑规格、自备电脑的配置要求，以及防火墙与防病毒软件的设置方法。

ADC 从偶联到制剂：Stunner 测 DAR，Uncle 测 Tm

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

用三种 payload/linker 组合偶联同一支单抗，Stunner 2 µL 同时筛 DAR、浓度、粒径和 PDI，建立候选物标准（DAR 2–4、PDI ≤ 0.1、回收率 > 80%）。Uncle 9 µL 做 Tm/Tagg 制剂筛选：trehalose 稳定效果最好，马来酰亚胺 ADC 的 Tagg 从 71.6 °C 提升至 76.2 °C。全部 SD < 1 °C。

【Webinar】高浓度蛋白测粘度：10 个样品并行

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

产品经理 Andre Mueller 演示 Honeybun 的完整工作流：从测量原理、加样操作到配方筛选实战。涵盖低体积模式验证、温度依赖性测量、牛顿/非牛顿流体判定。含中文字幕和章节导航。

【Live Demo】Honeybun 现场测粘度全过程

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

13 分钟的现场演示：Kevin 从 Bun 耗材的三段式微流控结构讲起，实时加样、推入仪器、点 Start 看蓝绿甘油样品流动，45 秒拿到粘度曲线。第二轮用三个同样蓝样验证精密度、另用 15 µL 绿样演示低体积模式。Ross Walton 现场回答量程、耗材复用、气源要求、单抗浓度上限等 Q&A。

哪些溶剂能用，哪些不能？Bun 耗材兼容性与自吸风险

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

Bun 微流控通道与溶剂的兼容性取决于浓度。浓度过高时样品会自行吸入通道（自吸），影响测量或污染仪器。本文列出各组分的安全浓度上限和 Bun 材料的化学耐受性。

怎样制备 Honeybun 的高粘度标准品？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

Honeybun 测量范围 0.5–150 cP，不兼容硅油基标准品。本文介绍如何制备 83.3% 甘油水溶液（~150 cP）作为高粘度验证标准品。

Honeybun 使用规范：加样前先查自吸

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

Bun 耗材结构说明（Input Well / Resistance Channel / Measurement Channel）、自吸（self-loading）现象的判断方法（30 秒观察法 + 相机画面颜色判断）、加样体积要求（默认 35 µL / 低体积 15 µL）、Bun 保存和复用注意事项。

只有 15 µL 样品，粘度还能测准吗？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

低体积模式只需 15 µL 样品，在 0.5–150 cP 全范围内的测量值与默认模式（35 µL）无显著差异。用 MGVS 标准品、甘油和两种高浓度 mAb 的数据验证。

170 mg/mL 单抗要升到多少度，粘度才降到 20 cP 以下？

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

两种 170 mg/mL 单抗在 4 °C 下粘度都高于 20 cP：mAb2 约 13 °C 降到阈值以下，mAb1 要到约 28 °C。Honeybun 用 35 µL 样品在 4–45 °C 范围内测定 0.5–150 cP 粘度，一次最多 10 个样品。

6 分钟，10 个样品，35 µL 就够了

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

粘度数据贯穿生物制剂开发全程。Honeybun 用 BSA 和 IgG 的实际数据，展示如何在不同浓度和温度下快速获取粘度信息。

Honeybun 一览：面板、接口、电源和 Bun 耗材

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

每次测量仅需 35 µL 样品，几分钟内完成多达 10 个样品的粘度检测。涵盖前后面板、状态指示灯、电源要求和 Bun 耗材介绍。

Honeybun 仪器启动与样品装载

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

从开机到加样三步启动。默认模式每通道 35 µL，低体积模式每通道 15 µL，一个 Bun 最多同时测 10 个样品。

Honeybun 软件操作

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

从创建用户账户到设置实验参数、导入 Excel 样品表，再到将 Bun 插入仪器——Honeybun 软件的完整操作流程。

Honeybun 实验运行：从点 Start 到读懂结果文件

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

点击 Start 后 Honeybun 自动完成测量并生成结果文件。涵盖实验运行界面、Excel/HTML 报告内容、视频保存方法以及 Bun 取出步骤。

Honeybun 报告里到底有什么——10 cP 标准品完整走读

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

用一份真实的 10 cP 粘度标准品实测报告看 Honeybun HTML 报告的结构：Info 元数据区、Results 汇总表（5 通道 Viscosity/SD/CV%/剪切速率范围）、粘度对剪切速率曲线和 Details 逐点数据。

Honeybun 仪器维护

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

清洁前必须关闭电源并拔掉电源线。推荐清洁剂为稀释洗洁精和 70% 乙醇，禁止使用含酸碱或研磨剂的试剂。

Honeybun 故障排除

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

汇总 Honeybun 使用中常见的问题解答、典型故障现象和处理方法，涵盖 Bun 保质期、气泡处理、Guttering 现象和 12 种结果异常排查方案。

Honeybun 场地准备检查清单

Fri, 09 Oct 2026 00:46:17 GMT

安装前请逐项确认实验室环境：工作台与环境要求、气体要求、电力与网络要求、粘度标准品以及交付清单。