【Webinar】LNP 和 AAV 换液：Unagi 替代透析和离心柱

关于本次 Webinar

SM-102 LNP 从 12% 乙醇换进 PBS 并 4 倍浓缩，Unagi 用了不到 2 小时，乙醇残留降到 0.13%。这组数据对准的正是 LNP 换液的难处：有机相要尽快、温和地换掉，粒径和包封率才不受影响。AAV 的难处在另一头，产出时往往很稀，换液的同时还要浓缩，而且不能丢样。手动方法各有短板：透析要过夜，离心柱的死端超滤容易堵膜、丢样，TFF 搭建复杂，要大体积样品才划算。

Unagi 用压力式 UF/DF 换液，每一轮都按超声测出的各样品体积补液，所以各样品能分别达到换液和浓缩目标，同时保住回收率。过滤时可以同时开温和的轨道振荡，最高 1000 rpm，让样品保持悬浮、不在膜面聚集，离心柱的死端超滤则没有这种混合。一次并行跑 1-8 个样品，单样品 0.5 mL 起；稀的 AAV 可加配最多 40 mL 的 falcon 管走减样体积应用，单样品最多 48 mL。参数可以套用按分子和实验类型预置的 32 种预设，也可以针对具体的核酸、AAV、LNP 配方修改。

LNP 之外，Del Ray 还给了透析对照和 AAV 的数据。LNP 与透析并排对比，两者结果相当，但透析要过夜，Unagi 这一轮约 2.5 小时。AAV9 浓缩 12 倍到 1 mL，用了 90 分钟，衣壳和载荷保持完整。问答环节里讲者也交代了边界：MC3 等其他 LNP 配方的表现不能保证，AAV2 易自聚集，文献里已有调整缓冲液的办法。

### 你将了解到

• 00:00:00 · 00:00:52 · 开场介绍 · 主持人 Victoria 介绍 webinar 与演讲者 Del Ray Jackson。
• 00:00:52 · 00:02:45 · 开场引子：换液的三类挑战样品 · Del Ray 用《复联》开场，点出 LNP、AAV、核酸三类样品各自的换液痛点。
• 00:02:50 · 00:03:34 · 手动换液为什么不够用 · 透析慢、离心丢样、TFF 搭建复杂，客户实际使用中都有不便。
• 00:03:34 · 00:04:08 · Unagi 的关键参数 · 8 样品并行；单样品 0.5 mL 起，减样体积应用最多 48 mL;动手时间 <15 min。
• 00:04:10 · 00:05:13 · Una 耗材：膜材与截留分子量 · 再生纤维素膜，10/30/100 kDa 三档截留，LNP/AAV/核酸通用。
• 00:05:13 · 00:07:06 · UF/DF 技术原理 · 压力式超滤 + 透析过滤，运行开始就对每个样品做超声体积测量。
• 00:07:06 · 00:09:07 · 循环过程 + 减样体积应用 · 按每样品个性化加液，最多可配 40 mL falcon 管，共处理 48 mL 体积。
• 00:09:07 · 00:10:09 · 振荡混合 vs 死端超滤 · 离心柱的死端超滤会膜堵丢样；Unagi 可选温和振荡混合，保持样品悬浮。
• 00:10:11 · 00:13:25 · 软件控制 + 32 种预设 · 每循环去除量、目标换液率、目标浓度可调；按分子和实验类型预置 32 种参数。
• 00:13:29 · 00:15:13 · 暂停运行 / 手机通知 / 报告 · 样品提前完成可暂停取出；运行开始和结束时推送通知到手机；自动生成摘要报告。
• 00:15:13 · 00:17:13 · 🎬 Unagi 内部导览 · 实机介绍：缓冲液架、换液仓、吸头、超声体积传感器。
• 00:17:13 · 00:18:25 · 体积测量 + 加液精度 + 振荡数据 · 超声测量与称重法一致，加液 CV<1%，振荡最高 1000 rpm 可编程。
• 00:18:25 · 00:19:02 · 整体回收率概览 · 换液、换液+浓缩、纯浓缩，蛋白回收率约 96%。
• 00:19:02 · 00:19:43 · 核酸脱盐实测 · dsDNA 从 TE 换到核酸酶水并 3 倍浓缩，30 kDa Una，换液率 >96%。
• 00:19:43 · 00:21:04 · LNP 换液实测(SM-102) · SM-102 LNP 从 12% 乙醇换到 PBS 并 4 倍浓缩：不到 2 小时，乙醇残留 0.13%,PDI<0.1，粒径只升到约 80 nm。
• 00:21:04 · 00:22:00 · LNP vs 透析完整性对比 · Unagi 与透析并排对比，结果相当；透析要过夜，Unagi 这一轮约 2.5 小时。
• 00:22:00 · 00:23:52 · AAV 浓缩 + 血清型对比 · AAV9 浓缩 12 倍至 1 mL,90 分钟，衣壳完好；AAV5/9 对比 + pH 对 AAV5 聚集的影响。
• 00:23:52 · 00:24:36 · 总结 · 讲者总结：基因治疗载体的换液、浓缩和清理都能在 Unagi 上做，动手时间短，不以回收率为代价。
• 00:24:42 · 00:26:41 · Q1:压力是否对每孔相同？流速不同怎么办？ · 60/30/15 PSI 三档均匀施压；Unagi 按最快流速适配，优先保回收率；支持暂停取出已完成样品。
• 00:26:43 · 00:28:00 · Q2:其他 LNP 配方也适用吗？ · 无法保证所有配方(如 MC3)的表现，但振荡与循环参数可调，可适配具体样品。
• 00:28:03 · 00:28:32 · Q3:有其他膜材料吗？ · 目前只有再生纤维素；未来可能推出其他材质。
• 00:28:33 · 00:29:34 · Q4:其他 AAV 血清型表现如何？ · 多数 AAV 表现一致；AAV2 易自聚集最棘手，但文献已有缓冲液调整方案。
• 00:29:36 · 00:30:13 · Q5:必须用你们的吸头吗？ · 必须用指定规格的吸头，但不必从 Unchained Labs 采购；这种规格较通用，可从其他渠道买。
• 00:30:13 · 00:31:00 · Q6:50 mL AAV7 换液浓缩要多久？ · AAV 通常较稀、流速快，一般一小时到几小时内完成，具体看起始体积。
• 00:31:03 · 00:32:02 · Q7:最小截留分子量 10 kDa，有计划做 5 kDa 吗？ · 目前只有 10/30/100 kDa;其他截留规格在规划中，暂无时间表。
• 00:32:03 · 00:32:57 · Q8:可以远程查看报告吗？ · 软件本身只推送运行状态通知；报告可落盘到本地目录，搭配云同步服务可实现远程访问。
• 00:33:00 · 00:33:55 · Q9:有计划减小 Una 体积吗？低通量需求怎么办？ · Una 工作体积下限仍为 0.5 mL;如需更小体积，可选同技术的板式产品 Big Tuna(最低 100 µL)。
• 00:33:58 · 00:35:10 · Q10:给听众的建议 · 选换液方案时别只看数据，也要考虑实验室技术员的实际体验，自动化能把人从繁琐移液里省出时间。
• 00:35:13 · 00:36:03 · 主持人结语 · 致谢演讲者与听众，邀请填写反馈调查。
• 了解换液在生物药与基因治疗中的核心应用场景
• 看清手动换液处理 LNP 和 AAV 时的关键局限
• 用实测数据看自动化换液能否同时保住回收率和样品完整性