【Webinar】不用表面活性剂测 LNP 包封率和粒径

关于本次 Webinar

比色皿法测 12 样品的粒径，光手动操作就要至少 2 小时，因为样品要先稀释，再一个个上 DLS。而脂质纳米颗粒（LNP）要测的不止粒径，载荷定量和包封率（EE%）还各走一套流程。传统包封率检测要加表面活性剂裂解颗粒，还要孵育，也给结果带来不少变异。包载质粒 DNA（pDNA）的 pDNA-LNP 尤其棘手，表面活性剂会破坏 pDNA 结构，样品与标准曲线不再匹配，检测无法进行。

Stunner AF（AF 即 added fluorescence）在同一块 96 孔板上读 UV/Vis 吸光度、荧光和 DLS，把 LNP 的粒径和包封率放进同一流程。总载荷改由 UV/Vis 直接测，不再加表面活性剂，颗粒保持完整，所以 RNA-LNP 和 pDNA-LNP 都能做。整套包封率检测从配标准曲线、加样到读完整板约两小时，结果包括总载荷、游离载荷、粒径和多分散性。单测粒径的手动时间短得多：12 样品约 5 分钟。LNP 筛选时，一块板最多同时跑 44 个样品加标准品。

Kevin Lance 博士在演讲中展示了一批新数据：Stunner AF 同时测 RNA-LNP 和 pDNA-LNP 的包封率，颗粒不裂解，同一次测量还读出粒径和聚集。其中质粒 DNA LNP 的粒径为 115 nm，包封率 87%。

### 你将了解到

• 00:00:00 · 00:01:48 · 开场介绍 · 主持人介绍演讲者 Kevin Lance 博士。
• 00:01:48 · 00:03:14 · LNP 表征的挑战 · LNP 极度浑浊，一次检测需回答粒径、浓度、聚集、载荷、包封率多个问题。
• 00:03:14 · 00:05:13 · Stunner AF 技术概览 · 2 µL + 96 孔板 + 微流控，单次测 UV/Vis、DLS、荧光。
• 00:05:13 · 00:07:08 · 传统包封率检测的痛点 · 经典双臂法需表面活性剂裂解，对质粒 DNA 等敏感载荷会破坏构象。
• 00:07:08 · 00:09:46 · Stunner AF 包封率检测 · 用 UV/Vis 替代表面活性剂臂，无需裂解，一次板读取 12-44 样品。
• 00:09:46 · 00:13:02 · UV/Vis unmix 算法应对浊度 · 数学剥离浊度信号，提取 RNA/脂质组分，96 样品 CV 1.54%。
• 00:13:02 · 00:13:46 · tLNP 靶向 LNP 应用 · 同时解析 RNA 和蛋白总量，理解抗体偶联程度。
• 00:13:46 · 00:15:25 · 荧光与标准曲线 · RiboGreen 测游离 RNA，与经典双臂法的包封率结果吻合。
• 00:15:25 · 00:18:34 · 因需而变的 DLS · 抗体等小颗粒各向同性散射，LNP 散射强烈依赖角度。
• 00:18:34 · 00:21:34 · 旋转角度 DLS（RADLS） · 七角度扫描，0 度外推对聚集体敏感，聚集体掺入实验验证。
• 00:21:34 · 00:22:51 · 粒径浓度与通量 · 12 样品测粒径的手动时间：比色皿法至少 2 小时，Stunner 约 5 分钟。
• 00:22:51 · 00:24:26 · 综合案例：三种 LNP + 质粒 DNA · SM-102、ALC-0315、DDAB 三种 LNP。质粒 DNA LNP 115 nm，87% 包封率。
• 00:24:26 · 00:25:09 · 总结 · Stunner AF 一块板拿到 LNP 的粒径、载荷和包封率。
• 00:25:09 · 00:31:52 · Q&A 问答环节 · 8 个问题：Stunner AF vs Stunner、质粒 DNA 敏感性、自动化兼容等。
• 一台仪器、一次检测，同时得到粒径、载荷量和包封率
• 了解 UV/Vis 定量 LNP 及其载荷时面临的挑战和最新方法
• 理解免表面活性剂的包封率检测如何保持 RNA-LNP 和 pDNA-LNP 的颗粒完整性
• 学会用 Stunner AF 跑高通量 LNP 筛选：一块 96 孔板最多 44 样品加标准品