一管浑浊到肉眼可见的 Fluc-mRNA-LNP，不稀释、不加染料，Stunner 测得 RNA 81.2 ± 3.8 µg/mL，供应商的 RiboGreen 参考值是 80.4 µg/mL。常规做法则要分两头：DLS 测粒径一次只能跑一个样品，RiboGreen 测 RNA 要加去垢剂和标准曲线。Stunner 把高通量 DLS 和短光程 UV/Vis 整合在一起，从 2 µL 原液中同时拿到粒径分布、总 RNA 浓度和浊度。测 UV/Vis 加单角度 DLS，96 个样品不到 1 小时。
实验样品与条件
Fluc-mRNA-LNP 和空 LNP 由 Precision NanoSystems Inc（温哥华）提供。颗粒浓度和 RNA 浓度的参考值由供应商提供，其中 RNA 浓度用 RiboGreen 测定。LNP 由 GenVoy-ILM™ Lipid Mix + 编码荧光素酶的 mRNA 在 NanoAssemblr® Ignite System 上组装，再稀释到 PBS（pH 7.4）中。
Stunner 使用 RNA-LNP 应用。RNA 浓度按 260 nm 解卷积吸光度 + 浓度因子 40 计算。6 次重复，2 µL 样品。DLS 参数：粘度 1.002，折射率 1.334（20 °C，PBS）。
LNP 的 UV/Vis 吸收光谱由光散射主导，从紫外到可见光全波段都有散射信号。样品肉眼可见浑浊，传统分光光度计因此难以读出 RNA 的吸收贡献。Stunner 用 Unmix 算法把总光谱拆成三个组分：浊度、RNA 和脂质/缓冲液，再从中提取 RNA 的吸收信号来定量。
左：LNP 原始 UV/Vis 光谱，散射信号主导。右：Unmix 拆分后的各组分：RNA 81.6 µg/mL（单次测量值，6 次重复均值 81.2 ± 3.8），Turbidity (A260) 7.5，Lipids & Buffer (A230) 3.32。
染料法（RiboGreen）测 LNP 中的 RNA，要先加去垢剂裂解 LNP，而去垢剂本身可能干扰荧光信号。染料法还要做稀释系列和标准曲线，每一步都可能引入误差。Stunner 不加试剂、不稀释，直接从 2 µL 原液出结果。
Fluc-mRNA-LNP 样品：Stunner 测得 RNA 浓度 81.2 ± 3.8 µg/mL，RiboGreen 参考值 80.4 µg/mL。
Stunner（RNA-LNP 应用）
81.2 ± 3.8 µg/mL
RiboGreen®
80.4 µg/mL
日常测量不用稀释；这里专门做稀释，是为了验证线性。2 倍稀释系列下线性良好：y = 0.9804x，R² = 0.9968，斜率接近 1，线性下限到 1.2 µg/mL。
（A）Stunner 与 RiboGreen 测得的 Fluc-mRNA-LNP RNA 浓度对比。（B）2 倍稀释系列线性良好，y = 0.9804x，R² = 0.9968，线性下限 1.2 µg/mL。误差线 = ±1 SD。
RNA 之外，粒径是另一半信息。传统 DLS 仪器需要大量样品，一次只能测一个，很难批量筛选不同配方和工艺条件。Stunner 在板式格式上跑单角度 DLS，96 个样品不到 1 小时出完结果。软件以概览形式并排展示所有粒径分布，便于逐孔对比。数值结果可以导出 Excel 或 PDF 报告。
Stunner 对 96 个 LNP 样品的 DLS 粒径分布概览，不到 1 小时完成。
Fluc-mRNA-LNP 粒径结果（6 次重复）
79 nm
流体动力学直径
CV 1%
0.14
PDI
SD 0.02
单峰
强度分布
中等均一性
单分散样品 PDI ≤ 0.1，高度多分散 PDI ≥ 0.2。这批 LNP 的 PDI 0.14 介于两者之间，说明粒径有一定异质性。强度分布为单峰，说明没有明显的多群体分布。
Fluc-mRNA-LNP 的强度分布（左，单峰）以及流体动力学直径 79 nm（CV 1%）和 PDI 0.14（SD 0.02），6 次重复。
Unmix 拆出的浊度还能用来估颗粒浓度。Stunner 对 UV/Vis 光谱做 Unmix 拆分时，会算出样品的浊度贡献，以 Turbidity (A260) 报告。胶体体系的浊度取决于颗粒的大小和数量，与颗粒浓度线性相关。
Fluc-mRNA-LNP 和空 LNP 的浊度与预期颗粒浓度都呈高度线性（R² > 0.999）。两者斜率不同，因为粒径和组成不同（含核酸 vs 不含核酸），散射特性也不同。有标定好的标准品时，浊度测定可以快速估算 LNP 颗粒浓度。
Fluc-mRNA-LNP
y = 1E-12x
R² = 0.9998
空 LNP
y = 2E-13x
R² = 0.9999
y = Turbidity (A260)，x = 预期颗粒浓度 (particles/mL)
浊度 (A260) 与预期颗粒浓度（particles/mL）的线性关系。Fluc-mRNA-LNP（绿色）和空 LNP（灰色）因粒径和组成不同，斜率不同，但 R² 均 > 0.999。
Stunner 不加染料测得的 RNA 浓度与 RiboGreen 一致，粒径分布和浊度又在同一次 2 µL 测量里同时给出。因此在 RNA-LNP 开发中，Stunner 最实用的场景是正式染料法测定之前的初筛。用 2 µL 原液快速排查一轮，看哪些构建体、哪些脂质配方、哪些工艺条件值得继续往下推。粒径或浊度异常的样品直接筛掉，省下染料和时间。