【Live Demo】LNP 样品 2 µL 一次测浓度和粒径

关于本次 Live Demo

LNP 样品浑浊，直接拿到常规 UV-Vis 上测，光被颗粒散射挡住，几乎穿不过去。稀释到能读数，样品已经不是原来那个状态，聚集、包封这些都测不准了。所以纳米颗粒定量通常卡在稀释这一步。

Stunner 的办法是把微流控通道里的 UV-Vis 光程缩短到 1 mm 以下，让光能穿透浑浊样品；再用 Unmix 解卷积算法把光谱拆成浊度、载荷（RNA、蛋白、DNA）、脂质、缓冲液各自的贡献。于是 2 µL 原液就能同时给出 UV-Vis 和 DLS 结果，不用空 LNP 做对比空白；测总 RNA 浓度也不用走九步的 RiboGreen 染料流程。

31 分钟的演示里，Kevin Lance 从加样、软件设置讲到 RNA LNP 和自定义纳米颗粒（含 lysozyme 蛋白载荷）两个应用的结果解读。三复孔的 RNA 浓度 CV 为 0.93%，DLS 粒径 CV 为 0.83%。后半段 Nelis Denys 主持 Q&A，给出了几条使用边界，比如 ethanol ≤20%、粘度上限 40 cP。和 Uncle 比，Stunner 的 DLS 检测角约 142°，Uncle 是 90°。

### 你将了解到

• 00:00:00 · 00:01:02 · 开场与主持介绍 · Nelis Denys（Lunatic & Stunner 产品经理）主持，Kevin Lance（分析产品线 Marketing Manager）负责主讲，Zoom Q&A 说明。
• 00:01:02 · 00:02:32 · Stunner 核心：UV-Vis + DLS + 短光程 + Unmix · 2 µL 样品一次同时测 UV-Vis 和 DLS。微流控通道光程 < 1 mm，绕过 LNP 浊度遮蔽透射光的难题。固定光程 + Unmix 解卷积是做到纳米颗粒直接定量的关键。DLS 高通量一次最多 96 样品。
• 00:02:32 · 00:04:27 · Stunner Plate 加样演示 · 8×12 96 孔板，每孔 2 µL。两组样品：纯 RNA LNP 三复孔 + RNA LNP 加 lysozyme LNP 的混合样品（模拟蛋白偶联 RNA LNP）。反向移液避免气泡，样品直接取自原液、无需任何裂解或染料前处理。每种样品配一个水空白。
• 00:04:27 · 00:06:22 · 软件设置：RNA LNP 应用 + Excel 导入 · Client Stunner 软件，gene therapy applications 里选 RNA LNP app（三个开箱即用应用之一）。DLS 用默认采集设置。Excel 文件一键导入孔位、复孔分组、空白。mRNA 载荷 + 水缓冲液确认后上板。
• 00:06:22 · 00:09:05 · Unmix 解卷积原理讲解 · 等测量的间隙，用 PowerPoint 讲为什么不能简单用空 LNP 扣背景：浊度曲线依赖组分、粒径、浓度，没有可比空白。Unmix 算法把原始光谱拆成浊度（灰）+ 目标分析物（RNA，绿）+ 脂质和缓冲液（蓝）+ 残差，直接给总浓度。
• 00:09:05 · 00:11:40 · 等读数穿插 Q&A · 只测一个样品时每孔读数约 45 秒，配一个水空白约一分半出结果；不需要空 LNP（软件内置浊度曲线库）；自定义纳米颗粒支持任意载体；可接入自动化工作站提升通量。
• 00:11:40 · 00:16:58 · 结果解析一：RNA LNP 三复孔 · Analysis 软件总览 → 每孔 ~62 µg/mL RNA。Raw data 里浊度主导光谱、三复孔曲线完全重合。Processed signal 把浊度灰线扣出，绿色 RNA 拟合、蓝色脂质/缓冲液、黄色残差。61.5/62.5/62.9 µg/mL，DLS 104-105 nm。
• 00:16:58 · 00:19:20 · 结果解析二：自定义纳米颗粒 · Analytes menu 里自建 LNP，把 lysozyme 设为载荷、LNP 脂质 + mRNA 归到颗粒组分。切到 custom nanoparticles 应用对已跑的数据重新解卷积（不用重跑样品）。绿线改为 lysozyme 蛋白拟合，得到 0.34 mg/mL 蛋白浓度。
• Stunner 为什么能给浑浊的 LNP 样品直接定量：短光程 + 固定微流控 + Unmix 解卷积的分工
• 为什么不需要准备空 LNP 作背景：软件内置浊度曲线库的拟合机制
• RNA LNP 和自定义纳米颗粒（蛋白载荷 + 任意颗粒组成）两种工作流的差异
• 实测精密度指标：三复孔 RNA 浓度 CV 0.93%、DLS 粒径 CV 0.83%