三个供应商的 CsCl 纯化 Ad5 载体（AdV），在 Stunner 上测出三种情况：一家纯度高、无聚集，一家藏着多余的 DNA，一家已经没有完整的病毒颗粒。后两种问题，传统滴度方法都容易漏掉。qPCR 要数小时，而且只测序列特异的 DNA，看不出空壳有多少；A260 则要先做 SDS 变性预处理。这些方法还需要针对特定血清型优化，AEX-HPLC 也只能逐个跑样。
Stunner 的 Adeno Quant 应用把 UV/Vis、DLS 和 SLS 整合到同一次 2 µL 测量中，不需要预处理、染料、标准曲线，也不挑血清型。纯化样品的滴度从 1E9 cp/mL 起就能测，96 个样品一小时跑完。
实验条件
样品：3 批 CsCl 纯化的 Adenovirus 5 载体，分别来自 Vendor 1、2、3，−70 °C 保存，解冻一次后 4 °C 保存，4 天内完成全部测量（避免反复冻融）。
Stunner 设置：Adeno Quant 应用，4 次 DLS 采集 × 5 秒，水空白。UV/Vis 全光谱扫描，内置算法根据已发表的氨基酸序列计算摩尔消光系数，根据厂家提供的基因组大小（碱基数）计算 dsDNA 消光系数。
输出参数：总衣壳滴度、满衣壳滴度、dsDNA 滴度、蛋白滴度、% empty / % full、Z-average 粒径、PDI。
Stunner：UV/Vis + DLS + SLS 三合一平台，2 µL 完成 AdV 表征。
UV/Vis A260 是 AdV 滴度最快的读数方式，但腺病毒颗粒太大，散射光大，导致浊度叠加在吸收光谱上，A260 读数变异很大。传统做法是先用 SDS 煮沸变性样品再读数（颗粒打碎了就不散射了），但 30 分钟的预处理把"快"的优势抵消了。而且，文献对 A260 换算系数本身就有争议：1 AU₂₆₀ 到底等于 1.1×10¹² vg/mL、1.2×10¹² 还是 1.8×10¹²？
Stunner 用算法解决浊度问题。Unmix 把 AdV 样品的总 UV/Vis 吸收拆分成浊度（光散射贡献）和实际吸收，数学扣除浊度后直接出 A260，不需要 SDS 变性。
Stunner 的浊度校正：总吸收（黑线）= AdV 实际吸收（黄线）+ 浊度/光散射（灰线）。虚线标记校正后的 A260 值。不需要 SDS 变性。
但 A260 还有第二个问题：任何在 UV 区有吸收的组分（缓冲液成分、宿主细胞 DNA、游离蛋白）都会直接干扰结果。而在 AdV 纯化过程中，蛋白和 DNA 污染很常见。Stunner 通过结合 UV/Vis 和 DLS/SLS 来抵抗这类干扰：比如样品里有多余的游离 DNA，A260 会偏高，但腺病毒颗粒的散射强度不受影响。因此把两类信号对照着看，就能识别出这类干扰。
A. DLS 强度分布区分完整衣壳（绿色峰）、小颗粒（浅灰）和聚集体（深灰）。B. UV/Vis 光谱自动扣除浊度（浅灰线），剩余总吸收（黑线）拆分为 dsDNA（绿线）和蛋白（蓝线）。
Adeno Quant 数据分解：总衣壳（深蓝）、游离/聚集蛋白（浅蓝）、满衣壳（深绿）、游离/聚集 dsDNA（浅绿）。
Vendor 1 的 Ad5 样品四次重复测量，结果符合高纯度样品预期：总衣壳滴度平均 4.2×10¹² cp/mL（CV 4.9%），满衣壳滴度 3.4×10¹² vg/mL（CV 4.4%），% full 平均 81%。游离/聚集的蛋白和 DNA 只占总质量的约 13%。DLS 强度分布上四次重复相互重合，没有聚集峰，多分散性良好。
指标:结果
总衣壳滴度:4.2E12 cp/mL（CV 4.9%）
满衣壳滴度:3.4E12 vg/mL（CV 4.4%）
% full:81%
游离/聚集蛋白 + DNA:~13% of total mass
DLS:单分散，无聚集峰，PDI 低
A. 总衣壳和满衣壳滴度。蓝色 = 蛋白滴度（含总衣壳），绿色 = dsDNA 滴度（含满衣壳）。
B. % full（黄）81% 和 % empty（紫）。
C. DLS 强度分布，四次重复高度一致，无聚集。
Vendor 2：DLS 看起来没问题：单分散，Z-average 122.6 nm，落在单分散 AdV 常见的 100–200 nm 之内，PDI 不到 0.1。但 Adeno Quant 的完整图景暴露了一个隐患：样品中有大量多余的 DNA。这些 DNA 不属于腺病毒颗粒，很可能是宿主细胞 DNA 污染。如果只看粒径或只做 A260，这个问题会被漏掉。
Vendor 3：反过来，这个样品的蛋白和 DNA 总量比例完全符合纯化良好样品的预期，但 DLS 和 SLS 立刻揭示了大规模聚集。Stunner 把蛋白和 DNA 数据都标为"游离/聚集"（浅蓝色和浅绿色）。这表明样品里蛋白和 DNA 的量虽然对得上，但没有完整的腺病毒颗粒。这指向病毒稳定性可能出了问题：衣壳解体后，蛋白和 DNA 释放出来并聚集成大颗粒，比例却还保持着。
A. Vendor 2：DLS 显示单分散、无聚集（右），但蛋白/DNA 图上有大量多余 DNA（左），指向宿主细胞 DNA 污染。B. Vendor 3：蛋白和 DNA 总量正常（左），但 DLS 显示大规模聚集（右），所有蛋白和 DNA 标为「游离/聚集」。
单个参数看不到全貌
Vendor 2 只看 DLS 会判定通过，Adeno Quant 却发现了多余的 DNA。
Vendor 3 只看 UV/Vis 的蛋白/DNA 比例会判定正常，DLS 却发现了严重聚集。
UV/Vis + DLS + SLS 三种方法放在同一次测量里，这两类问题能一起捕获。
Vendor 1 纯度高、滴度稳定、无聚集；Vendor 2 粒径正常，但藏着多余的 DNA；Vendor 3 化学组成合理，颗粒却已经解体并聚集。三家的问题落在不同维度上，只测一个维度（滴度或粒径或 DNA 含量）的方法至少会漏掉其中一个问题。
Stunner 的 Adeno Quant 在不需要额外前处理、染料或标准曲线的情况下，从 2 µL 样品里同时给出滴度、空满比、游离蛋白/DNA 含量和聚集信息。所以这种多参数表征可以用在优化上游产量、跟踪纯化效果等环节，也可以作为批次放行时考察的关键质量属性（CQA）之一。