【Webinar】蛋白定量 10 分钟跑完 96 样品

关于本次 Webinar

测 96 个蛋白样品，微量台式光度计约要 1 小时，准确度和精度还不够；高准确度的方法只能一次测一个，用样量大，至少要 96 分钟。传统蛋白定量方法就这样在准确度、精度和通量之间只能顾一头，而且都不方便自动化。

Lunatic 把准确度、精度和通量做到同一台仪器上：2% 准确度、1% 精度，10 分钟跑完 96 个样品。这里的 10 分钟指双光程的 High Lunatic Plate。动态范围 0.03-275 OD，每个样品只要 2 µL。

准确度和精度用 NIST 标准品对照 USP 要求实测：NISTmAb 在 5 台仪器上各测八复孔，40 个读数全部落在认证值的 1.25% 以内。后半段看裂解液、磁珠残留和 spike-in 样品。HSA+DNA 的 spike-in 样品如果不做解卷积，蛋白浓度会高出 50%。

### 你将了解到

• 00:00:00 · 00:01:37 · 开场介绍 · 主持人介绍 BioPharm International 赞助的 webinar 和演讲者 Ross Walton 博士。
• 00:01:37 · 00:02:56 · 蛋白定量的权衡难题 · 早期研发看通量和低用量，越接近生产越看合规性，准确度和精度每个阶段都要。
• 00:02:56 · 00:03:31 · 一套方法覆盖各部门 · 2 µL、96 样品 10 分钟；各部门用同一方法，方法转移和排障都更简单。
• 00:03:31 · 00:04:08 · 微流控板核心技术 · SBS 布局 + 固定光程，0.03-275 OD 动态范围。
• 00:04:08 · 00:05:53 · 样品加载工作流 · 毛细作用吸入储液腔，最长 2 小时不蒸发。
• 00:05:53 · 00:06:22 · 与其他方法的通量对比 · 96 个样品：微量台式光度计约 1 小时，逐个测的精密方法至少 96 分钟，Lunatic 约 10 分钟（双光程 High Lunatic Plate）。
• 00:06:22 · 00:06:56 · 软件易用性 · 图形布局 + Excel 导入导出，降低培训成本。
• 00:06:56 · 00:08:35 · 高浓度与高通量实测 · 抗体稀释梯度八复孔光谱在全范围几乎完全重合；IgG 稀释梯度 CV <1%，2% 准确度 1% 精度。
• 00:08:35 · 00:09:18 · 与台式光度计的精度对比 · 四种蛋白各取四种浓度比较 CV，Lunatic 都更低。
• 00:09:18 · 00:11:09 · Unmix 处理细胞裂解液 · 解卷积分离蛋白、核酸和浊度贡献。
• 00:11:09 · 00:12:36 · 真实裂解液案例 · Unmix 同时报告杂质和浊度 A280 值，辅助纯化决策。
• 00:12:36 · 00:13:35 · 磁珠残留实例 · 磁珠残留的 A280 比蛋白本身还高，Unmix 能直接识别。
• 00:13:35 · 00:14:59 · Spike-in 对比验证 · HSA+DNA 和 IgG+磁珠 spike-in，不做解卷积浓度高出 50%。
• 00:14:59 · 00:15:33 · 面向后期：独立标准 · 越到后期越需要 NIST 等独立标准验证系统性能。
• 00:15:33 · 00:16:46 · NIST SRM 2082 验证光程 · 色氨酸和尿嘧啶标准 40 读数全在 1.65% 以内。
• 00:16:46 · 00:18:30 · NISTmAb RM 8671 整机验证 · 10 mg/mL 单抗标准 40 读数均在 1.25% 以内，满足 USP。
• 00:18:30 · 00:21:18 · Fundamentals 内置校准 · 5 支色氨酸标准安瓿，16 复孔跑完全动态范围。
• 00:21:18 · 00:22:16 · Fundamentals 结果输出 · 自动计算回收率、RSD、R²，Excel/PDF 导出接入 LIMS。
• 00:22:16 · 00:23:35 · PV kit 药典合规 · 逐项检查 USP 和欧洲药典对 UV/Vis 的要求，每项报告是否通过。
• 00:23:35 · 00:23:59 · IQOQ + 21 CFR Part 11 · 可纳入 IQOQ，审计追踪、电子签名全支持。
• 00:23:59 · 00:24:27 · 自动化集成 · SBS 兼容，SiLA/API 集成，条形码追溯。
• 00:24:27 · 00:25:08 · 总结 · 统一的蛋白定量方案，不再在准确度/通量/合规之间取舍。
• 00:25:08 · 00:33:38 · Q&A 问答环节 · 7 个问题：浓度范围、E1%、杂质检测、核酸、合规、维护、混合蛋白。
• NISTmAb 在 5 台仪器上的读数离认证值多远，能不能满足 USP 要求
• 了解 2 µL 样品即可实现 2% 准确度、1% 精度的蛋白定量
• 理解 Lunatic 如何应对裂解液、磁珠残留、高浊度等复杂的真实样品