外观相近的两管血浆，胆红素可能相差约 7 倍。Lunatic 的 Plasma QC 应用用 2 µL 样品、约 10 分钟，把血红蛋白、胆红素、蛋白质和浊度拆开定量，每管血浆的质量由此变成一组数字。
cfDNA 提取、液体活检、生物标志物发现，起点都是血浆。血浆质量直接影响下游结果，但大多数实验室的质控方式仍然是举起管子，看颜色，判断清不清澈。
这种目测对几种关键组分并不敏感，结果还因人而异，质量不同的血浆因此可能被判成一样。
目测评估的三个盲区
1溶血被掩盖:低浓度血红蛋白的粉色，在深色血浆背景下肉眼几乎看不出来2胆红素和蛋白混淆:黄色既可能来自胆红素（icteric），也可能是高浓度蛋白的本底3操作员差异:同一管血浆，两个人可能打出不同的分数
于是，外观相近的两管血浆可能进入同一批实验，下游得率却明显不同。复盘流程、排查试剂之后，原因往往落回起点：血浆本身的质量就不一样。
Lunatic 的 Plasma QC 应用属于 Unmix 系列。它对每个样品做全波长 UV/Vis 扫描，然后用内置的解卷积算法（deconvolution）把总吸收光谱拆成四个独立组分。每个组分有自己的吸收特征峰，因此可以分别定量。
组分 / 特征峰 / 计算方式
血红蛋白:特征峰 A410;计算方式 峰值 × 浓度因子 13.23
胆红素:特征峰 A450;计算方式 峰值 × 浓度因子 1.24875
蛋白质:特征峰 A280;计算方式 默认 E1% 消光系数 10
浊度:特征峰 背景光谱;计算方式 从总光谱中扣除，报告 OD660
血浆的蛋白含量通常在 60–80 mg/mL，在 280 nm 处产生强烈的吸收峰，足以把血红蛋白和胆红素的信号完全淹没。因此，Lunatic Analysis 软件展示 Unmix 拟合结果时，默认只显示 350–650 nm 范围。在这段波长里，四种组分的峰位置清晰分开，拟合好坏可以直接从图上判断。
Lunatic Analysis 软件把 UV/Vis 吸收光谱拆分为血红蛋白（红）、胆红素（橙）、蛋白质（绿）和浊度（灰）四个独立组分。黑色曲线为扣除背景后的样品光谱。
残差值（RRSE）是拟合质量的指标，数值越低，四组分模型对实测光谱的解释越完整。当残差超过 2.5%，软件会发出警告，常见原因是样品浊度过高、存在模型外的未知组分，或样品浓度过低。
Lunatic 支持手动加样或机器人对接，96 个样品约 10 分钟完成分析（High Lunatic Plate）。
在 Lunatic Client 软件中选择 Plasma QC 应用：Sample Type → Other → Unmix → Plasma QC。
Lunatic Plate 拥有 96 条独立微流控通道，每个样品仅需 2 µL，样品进入密闭通道后最多 2 小时内不蒸发。
该应用同样适用于 Little Lunatic:最多 16 个样品，约 2 分钟出结果，使用 Lunatic Chips。
下图中的两管血浆，颜色和透明度几乎无法区分，Lunatic 测出的胆红素含量却相差约 7 倍。
两管的血红蛋白同样相差数倍（见下表），下游 cfDNA 得率相差 18%。本例只说明这些差异同时出现，不能据此认定胆红素或血红蛋白就是得率下降的原因。
两管血浆外观相似（深黄透明 vs 浅黄透明），Lunatic 测出胆红素含量分别为 3.06 和 0.43 mg/dL，相差约 7 倍。
深黄色，透明
Hemoglobin33.14 mg/dLBilirubin3.06 mg/dLProtein67.83 mg/mLTurbidity0.18 OD660
浅黄色，透明
Hemoglobin5.2 mg/dLBilirubin0.43 mg/dLProtein60.87 mg/mLTurbidity0.07 OD660
在血浆进下游分析之前先按实测数值做一轮质量分层，研究人员就能给自己的流程划一条样品质量线，不必等到事后复盘才发现问题出在起点。
有了 Plasma QC 的数值，血浆质控可以按阈值判定是否合格。评估上游采集流程是否一致时，结果也不再取决于谁在操作。
阈值要由各实验室按自己的下游流程来定，例如用历史样品对照下游得率，找出胆红素和血红蛋白的可接受上限。
感谢 RUCDR Infinite Biologics 和 Brooks Life Sciences。